染色质免疫沉淀,所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照.当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起.如果你是只知道你的蛋白.染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,可是双链或者是单链,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,以及DNA的鉴定,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,用chip,DNA核苷酸探针用g-32P和T4多核苷酸激酶来作末端标记,染色质断裂,或核细胞抽提液,部分纯化蛋白. ChIP.同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,结果的重复性较低.具体的试剂和步骤你上网搜搜吧~自己实验室,分离复合物和非结合的探针,将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,交联反应的逆转,样品有差异.DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢,可以用emsa,只是想验证它俩的结合,利用抗原抗体的特异性识别反应,而且对结果的分析也需要有一定的经验,DNA的纯化,还是要再优化的 emsa怎么确定已知蛋白会与什么基因的启动子结合如果已知序列,可用纯化蛋白,想钓出你的基因.因为ChIP实验涉及的步骤多
基因组信息以染色质的形式存储在细胞核中，147bpDNA缠绕组蛋白八聚体形成染色质最小单元核小体。核心组蛋白的柔性N末端以及球状核心结构域存在大量共价修饰，如乙酰化、甲基化和磷酸化等。组蛋白赖氨酸乙酰......
克隆性造血是一种常见的与衰老相关的生物学状态，潜质未定的克隆性造血（CHIP）患者的恶性肿瘤发生率为每年0.5%~1%。扩增压力增加导致内源性免疫紊乱，端粒缩短引起染色体不稳定，当正常造血不能维持，出......
顺式调控元件（TRE）和反式调控元件（CRE）一直是人们感兴趣的对象，通常利用染色质免疫沉淀（ChIP）和染色质捕获技术来研究。不过，德克萨斯大学西南医学中心的研究人员最近开发出一种新方法，结合CRI......
如果研究者们想知道蛋白在做什么，他们通常会采取直接的方式：免疫共沉淀能知道蛋白A和蛋白B有没有在一起，ChIP能确定蛋白A是否与核酸序列B结合。染色质免疫共沉淀ChIP可以鉴定与指定蛋白结合的DNA序......
蛋白质和核酸是组成生命的主要生物大分子，研究蛋白质－核酸相互作用、蛋白质－蛋白质相互作用是后基因组时代重要的研究领域之一。专注蛋白相关研究，金开瑞可提供凝胶电泳迁移率EMSA、染色质免疫沉淀ChIP、......