如何高效地感染原代细胞

　　原代细胞的感染一直是个麻烦的事情。把一个基因导入到细胞里，有4个常用的方法。

　　1、质粒+转染试剂。质粒转到细胞里面是需要借助转染试剂才能进细胞的。普通细胞可以采用这种方法，但这种方法对原代细胞来说，转染效率不高。

　　2、质粒+电转仪。电转的转染效率比加转染试剂的会高。只是电转仪比较少实验有，并且电转时候造成细胞膜损坏，细胞死亡率高。

　　3、慢病毒。慢病毒容易包装，许多人会用来尝试感染，但大部分感染效率不会特别好。

　　4、腺病毒，是感染原代细胞的好帮手。腺病毒有ad5和ad5F35两款。

　　ad5：平常所说的普通腺病毒，它感染细胞是通过自己的纤突蛋白与细胞受体CAR结合来实现的。感染原代细胞能力比慢病毒高很多。

　　Ad5F35：他跟ad5的区别是，受体结合位置的纤突（Fiber）改造成了Ad35型腺病毒的纤突。因此Ad5F35，其感染细胞受体从Ad5的CAR变成了CD46。CD46在绝大部分人源的细胞中都存在。在Ad5转导效率较低的CD34+细胞，比如造血系统细胞和干细胞上，Ad5F35也有非常好的感染效率。Ad5F35对造血系统细胞、干细胞、免疫细胞，感染效率都不错，例如DC细胞，jurkat细胞。

　　结论：感染原代细胞首选腺病毒。