尿液干化学分析仪的光学测定原理

　　尿液分析仪是测定尿中某些化学成分的自动化仪器，它是医学实验室尿液自动化检查的重要工具，此种仪器具有操作简单、快速等优点。但是尿液分析仪人使用不当和许多中间环节及影响因素都直接影响自动化分析结果的准确性，不仅会引起实验结果的误差，甚至延误诊断因此要求操作者对自动化仪器的原理、性能、注意事项及影响因素等方面的知识在有充分的了解，正确地使用自动化仪器，这样才能使尿液分析仪得出的结果更可靠、准确。

　　一、尿液分析仪原理

　　此类仪器一般用微电脑了控制，采用球面积分仪接受双波长反射光的方式测定试带上的颜色变化进行半定量测定。试剂带上有数个含各种试剂的试剂垫，各自与尿中相应成分进行独立反应，而显示不同颜色，颜色的深浅与尿液中某种成分政权比例关系，试剂带中还有另一个“补偿垫”，作为尿液本底颜色，了对有色尿及仪器变化待所主生的误差进行补偿。

　　将吸附有尿液的试剂带放在仪器比色槽内，试剂带上已产生化学反应的各种试剂垫被光源照射，其反射光被球面积分仪接收，球面积分仪的光电管被反射的双波长光（通过滤片的测定光和一束参考光）照射，各波长的选择由检测项目决定。

　　二、尿试带试验方法

　　1.尿PH检查：结果有二重含义：①反映体内酸碱代谢状态；②由于尿蛋白、尿比密的测定原理是基于膜尬上最后PH试剂的颜色变化，因此分析PH变化还有监控尿PH变化对其它膜尬区反应的干扰作用。

　　2.尿比密检查：尿比密测定曾采用悬浮法和折射仪法，主要测定尿内固体物浓度随着10项尿液分析仪的问世，试带法测定尿比密得到广泛使用，其膜块中主要含有多聚电解质（甲乙烯酸酰马不酐）、酸碱指示剂及缓冲物，这是采用酸砖瓦指示剂法，其原时是根据经过多聚电解质的Pka改变与尿液离子浓度相关原理。麻剂条中的多聚电解质含有随尿标本中离大浓度则解离的酸性基团，离子越多，酸性基团解离子越多，而使膜尬中的PH改变，这种改变可由膜块中的酸碱性指示剂的颜色变化显示出来，进而换算成尿液的比密值。

　　3.尿蛋白检查尿液分析仪尿蛋白测定是根据指示剂蛋白误差原理，膜块中主要含有酸碱性指示剂溴酚兰、枸橼酸缓冲系统和表南的活性剂。在PH3.2时，溴酚产生的阴离子，与带阳离子的蛋白质（白蛋白）结合后发生颜色变化。

　　4.尿葡萄糖测定：尿试带法测定尿葡萄糖是采用酶法。其膜块中含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和色原。不同厂家采用的色源有异主要有二类：①采用碘化钾做色原，阳性反应呈红色；②采用邻甲联苯胺作色原，阳性反应呈蓝色。其测定原量是葡萄糖氧化酶把葡萄糖氧化成葡萄糖醛酸和过氧化氢，后者再由过氧化物酶催化释放出[0]，而使色原呈颜色，以此类方法最常用。

　　5.尿酮体检查：检测尿酮体的膜块中主要含有亚硝基铁氰化钠，或与尿液中的乙酰乙酸、丙酮主生紫色反应。其对乙酰乙酸的敏感性为50-100mg/L对丙酮则为400-700mg/L，不与β-羟丁酸起反应。

　　6.尿胆红素、尿胆原检查：尿胆红素测定原理是结合胆红质在强酸性介质中，与2，4-二氯苯胺重氮盐起偶联反应呈紫红色；测定尿胆原的原理与改良Ehrlich法相同。

　　7.尿亚硝酸盐检查：膜块中主要含有对氨基苯砷酸和1，2，3，4-四羟基对苯喹啉-3酚。大多当数尿路感染由大肠埃希菌引起的，正常人尿液中含有来自食物或蛋白质代谢产生的硝酸盐，池尿液中有大肠埃希菌感染增殖时，将硝酸盐还原为亚硝酸盐，可将膜块中对氨基础苯砷酸重氮化而成重氮盐，后者与1，2，3，4-四羟基对苯喹啉-3鞭偶联使膜块产生红色，借以诊断患者是否被大肠埃希菌感染，其检出敏感度为0.03-0.06g/l。尿液中亚硝酸盐检出率受感染细菌是否含有硝酸盐还原酶，食物中是否含有选题的硝酸盐、尿液标本是否在膀胱停留4小时以上三者影响，符合上述三个条件，此试验的检出率为80%，反之可呈现阴性结果。因此本试验阴性关不能排除细菌尿的可能，以样亚硝酸盐试验阳性也不能完全肯定泌尿系统感染，标本放置过久或污染可呈假阳性，应结合其它尿液分析结果，综合分析得出正确的判断。

　　8.尿白细胞检查：尿试带法检查尿内白细胞的原理基于中性粒细胞胞质内含有特异性酯酶，可或作用于膜块中的吲哚酚酯，关与重氮盐反应形成紫色缩合物，其颜色深浅与中性粒细胞的多少呈正比例关系。操作时应注意：①尿液标本必须新鲜，留尿后应立即测定，以免白细胞契坏，导致干化学法与镜检法人为的实验误差；②此法只能测中性粒细胞，不与单核细胞、淋巴细胞反应，在肾移植病人发生排异反应时，尿中的以满面春风巴细胞为主的或其它病因引起的单核细胞尿时会产生阴性结果；③尿液中污染甲醛或含有高浓度胆红素或使用某些药物时，吉产生假阳性；尿蛋白>5g/L或尿液中含有大剂量先锋霉素等红物时，可便结果偏低或出现假性结果。

　　9.尿血红蛋白、尿红细胞检查：膜块中主要含有过氧化氢茄香素或过氧化氢烯钴和色原（如邻甲联苯胺）两种物质。其原理为尿液中红细胞内的血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具有过氧化氢酶样活性，可使过氧化氢茄香素或过氧化氢烯钴分解出[0]，后者能氧化有关色原（如邻甲联苯胺）使之呈色。