做试验前要先学会冻存，以备自己在后面的试验中能坚持同一来源、稳定牢靠的细胞，且可减少污染或其它不利影响。你们细胞是怎样冻存的?求解！我的是4度冰箱放半小时,-20度冰箱半小时,然后转移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1个月后,细胞复苏就感觉状态不太好了！
影响冻存细胞活性的因素
1，细胞冻存保护剂：常用的有二甲基亚砜（DMSO）和甘油，常用的浓度为5%-10%（90%小牛血清）。DMSO对二倍体细胞的毒性较甘油小。
2，细胞悬液的冻住速度：慢冻时冰冻在细胞外形成，因此不致危害细胞。多数细胞以每分钟下降1℃的速度，降至-20℃冻住。均可取得满足效果。
3，保存温度：液氮罐，可到达-196℃，此刻所有的物理化学活动均降至zui低限度，以确保细胞长时间保存。
4，复苏：急速消融复苏可防止危害细胞。冻住细胞从液氮中取出后，应立即放入37℃~43℃的水浴中，30秒至一分钟内消融。
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