徕卡激光扫描共聚焦显微镜功能概述

一、图像处理功能

1．组织光学切片：共聚焦成像利用照明参与探测点火驱这一特件，可有效抑制同—焦平面上非测量点的杂散荧光及来自样品4非焦千向的荧光．从而获得普通光镜无法达到的分辨率，同时具有深度识别能力（zui大箔度’般为200一400ym）及纵向分辨率，因所能看到较厚生物标本中的细节。它以一个破动步进马达（zui小步距可达o．1ym）控制另物台的升降，可以逐层获得高反差、高分期率、高灵敏度的二维光学横断面团炼，从而死活的或团定的细胞及组织进行无损伤的系刃“光学切片”、得到其名层面的信息。这种功能也被形嫁地称为“显影C’r”。

2．三维图像重建：徕卡激光扫描共聚焦显微镜通过薄晨光学切片功能，可获得标本的真正意义上的二维数据，经计算机图像处理及三维重建软件，沿X、Y和Z勒或其它任意角度来观察标本的外形及剖面，并得到其三维立体结构，从而能十分灵活、直观地进行形态学观察，并揭示亚细胞结构的空间关系。

3细胞物理和生物化学测定：徕卡激光扫描共聚焦显微镜可进行低光探测、活细胞定量分析和重复性的荧光定量分析．从而能对单细胞或细胞群的溶酶体、线粒体、内质网、细胞骨架、结构性蛋白质、DKA、RNA、酶和受休分子等细胞持异结构的含量、组份及分布进行定性、定量、定时及定位测定，同时还可测定分子扩散、膜电位、氧化——还原状态和配体结合等生化反匝变化程度、

另外，徕卡激光扫描共聚焦显微镜可以对细胞的面积、平均荧光强度、积分荧光强度、细胞周长、形状因子及细胞内颗粒数等参数进行自动测定。

4荧光的定量、定位分析：徕卡激光扫描共聚显微镜可对单标记或双标记细胞及组织标伞的共聚焦荧光进行定量分析，并显尔荧光沿2轴的强度变化；同时还可自动将荧光

闯像与象差图像重叠以显示荧光在形态结构的定位。另外，借助于光学切片功能可公毫下损失分辨率的条件g：测量标本深居的荧光分布。徕卡激光扫描共聚焦显微镜也非常适用于高灵敏度的快速免疫荧光测定，可以准确除测抗原表达、资光原他杂交斑点及细胞结合和杀伤的形态学持性并作定量分析。

5．它细胞内离子的实时定量测定；利用F1uo—3、Indo—1、FMra—Red等多种荧光探针，徕卡激光扫描共聚焦显微镜可对单个细胞内各种离子（cah、K、Na、M82和PII）的比例及动态变化作毫秒级实时定显分析；可以定量探测胞质中c。‘对肿瘤启动因子、化学因子、生长因子及各种激素等刺激的反应*使用双荧光探针F1tM—3和SNARF可同g六则定ca：—和pH值。因此．激光扫描共聚焦显镇镜能完成活细胞生理信号的动态监测。