徕卡荧光显微镜镜检术的样品制作以及注意事项

在徕卡荧光显微镜中样品的制作与一般制片方法相同，但以新鲜材料为好，否则材料经各个制片步骤处理后，往往使固有荧光增强或消失，其要求：

1.在徕卡荧光显微镜中不要用本身能产生荧光的药剂，一般用酒精，甲醛作固定剂，但时间不宜过长（甲醛能使组织发出青绿一青白色荧光；酒精、苯、丙酮等时间一长可使荧光物质大量溶出；苦味酸本身有固荧光，不能使用），甲醛以甲醛气进行固定为好。

2.在徕卡荧光显微镜中切片不能太厚，约在10nm左右，尤以透射式荧光镜检时要求更甚。

3.在徕卡荧光显微镜中在徕卡荧光显微镜中蛋白粘贴剂不能用以荧光色素处理的材料，因蛋白能为荧光色素染色，而发生附加荧光。

4.在徕卡荧光显微镜中如为石蜡制片，脱蜡必须彻底，因石蜡有青色荧光，切片进入水后，应充分水洗，再经萤光色素处理，用水封固进行镜检。

5.在徕卡荧光显微镜中载玻片，盖玻片为萤石玻璃制成，如为普通玻璃，要色泽洁白，厚度要符合标准。同时不能有灰尘及有机物质，否则将会发生荧光而干扰正常的镜检效果。

在徕卡荧光显微镜镜检过程中注意事项：

1.激发光长时间的照射，会发生荧光的衰减和消失现象，因此尽可能缩短时间，暂时不观察时，应用档板遮盖激发光源。

2.作油浸观察时，应用“无荧光油”，尤其是在U、V激发时因香柏油带有青色荧光。

3.荧光几乎都较微弱，应在较暗的室内进行，新型的目镜带有遮光罩，拔出可遮挡外来光的干扰。