戴安P680型高效液相色谱仪（含自动进样器）使用

1 按下稳压电源工作电源开关键至“ON”状态。依次接通P680型输液泵、ASI-100自动进样器、柱温箱、检测器、电脑。

2 更换蠕动泵清洗瓶中5%的甲醇(如果仪器经常使用则建议每周更换两次，如果仪器很少使用则每次使用前必须更换。)

3 确认洗针瓶中的洗液是否太少，若太少，则需补充或更换。洗液一般为：50%的甲醇。

4 排泵内气泡

4.1 拧松泵右侧的快速清洗阀（反时针两圈左右）。按下泵前面板右下方的“Purge”键，排泵内气泡，仪器将以6.0ml/min的速度自动快速清洗泵内残留的气泡，5分钟将自动停止。若想手动停止，则再按“Purge”键，将停止清洗。

4.2 将每个需要使用的通道分别排完气泡后，拧紧快速清洗阀（顺时针拧紧，注意不要拧得过紧）。

5 系统联机

5.1 检查确认密码钥匙已与计算机联结，鼠标左键双击桌面下方工具栏的“Chromeleon”图标，打开 [Chromeleon Server Monitor]，点击[Start]，待变色龙图标变成灰色，并显示“Chromeleon Server is running idle”时，关闭[Server Monitor]。

5.2 鼠标左键双击桌面的“Chromeleon”图标。双击右边方框中的“HPLC-Graphics.pan”，点击泵模块下的“Settings”键，将跳出泵的设定窗口，设置完成后，按右下方的“Close”关闭该界面。点击自动进样器模块下的“Settings”键，将跳出进样器的设定窗口，设置完成后，按右下方的“Close”关闭该界面。点击检测器模块下的“Settings”键，将跳出一个泵检测器的设置窗口，设置完成后，按右下方的“Close”关键该画面。

6 序列进样

6.1 新建一个程序文件

6.1.1 依次点击File/New，选中“Program File”后,进入程序编辑向导界面。

6.1.2 确认泵的工作方式（“Isocratic”等度分析、“Ramp”二元梯度分析、“Multi-Step Gradient”多元梯度分析）、合适的流动相通道及高/低压极限和流速。

6.1.3 自动进样器的参数设置，每一个参数后面都有一个推荐值，一般不做改动。

6.1.4 通道的选择，设定采集一个样时需要采集的时间段（Acquisition Time），也可以不从0分钟开始采集，也就是前面一段时间不采集信号。

6.1.5 紫外信号的具体设置，设定检测波长，波长带宽，参比波长，参比波长带宽。一般设定带宽为1nm，设定参比波长为600 nm，参比波长的带宽为1nm。

6.1.6 设定完成后浏览程序参数，编辑、修改不适合处，最后单击工具栏中的“保存”按钮，给新建的这个程序起一个名字，若要新建一个文件夹，可点右上方的新建文件夹，然后将这个程序文件放入其中。

6.2 建立方法文件

6.2.1 依次点击File/New，选中“Method File”后，进入方法编辑向导界面。方法文件是在进完样后采集到谱图进行处理数据时需要用到的，所以现在不需要做任何改动。不能够等谱图出来之后再去建方法文件。最好将它和刚才建的程序文件放在同一个文件夹里。

6.3建立新序列文件

6.3.1 依次点击File/New，选中建序列文件“Sequence （using Wizard）”，后进入序列编辑向导界面。

6.3.2 设定样品信息

6.3.2.1 设定样品名称，如果待测样品溶液名字一样，只是序号是按顺序递加的，可以在方框的空白处输入待测样品溶液名，并通过右边的三角箭头使用“sample Number”，让软件自动加上一个序号。“Number of ”为待测样品溶液的个数。“Injection per”为每个待测样品溶液需要进样的次数。

“Start”为第一个待测样品溶液放在自动进样器上的位置，如果所测的待测样品溶液是按顺序放在自动进样器上的，则输入第一个待测样品溶液的位置，软件会自动输入以下各个待测样品溶液的位置。“Injection”为进样体积。

6.3.2.2 设定好后，按左下方的“Apply”后，可将待测样品溶液的信息在右方以列表的方式显示出来。

6.3.3 设定对照品信息

6.3.3.1 同设定样品信息。但有时候由于待测样品太多，花的时候较长，为了防止保留时间漂移，峰面积有变化，消除系统的误差等原因，需要采用间隔进样的方式进样。“Variatio standards after each unknown”意思为每进几个标准溶液后进几个待测溶液，再进个标准溶液后进几个待测样品溶液。

6.3.3.2 设定好后，按左下方的“Apply”后，可将所有样品溶液的信息在右方以列表的方式显示出来，且标准溶液在前，待测样品溶液在后。