1、标本的正确采集与抗凝剂的正确使用
标本的正确采集是保证检测准确性的关键之一。血液的流变性受到多种因素的影响,诸如生物节律、饮食以及运动等,均可影响红细胞压积、血浆蛋白组分,进而影响到全血粘度及血浆粘度。
因此,为保证检测的准确性,应特别注意采血时间及摄食时间,曾有研究表明,血液粘度有昼夜节律的变化:一般一昼夜出现两次高峰,分别在上午11时及晚间20时。国际血液学标准化委员会指出要注意这一影响。为此,一般把采血时间定为早晨空腹时。
但鉴于中风、心肌梗塞等急症,不一定发生于空腹时,对这类患者常不考虑空腹采血,但需注明餐后几小时采血;女性月经期血粘度偏低,应避开经期。
在采血方式上,也应注意避免造成血粘度误差的因素,如采血时压脉带的压力大小、血管受压时间长短等均对血粘度检测结果有所影响,血管在较高的压力下受阻时间长,则血液会有所浓缩。
因此,采血应尽可能减少压脉带对血管的压力,应尽可能缩短血管受压的时间,针管应采用内径较大的针头(7号以上),采血速度应迅速,但抽力不宜过大,以免对红细胞造成损伤。
另外,全血粘度、血浆粘度及红细胞压积还受体位的影响,这些指标立位时高于坐位,坐位时高于卧位,在通常情况下取坐位采血,当然危重患者除外。采血之后血液的混匀与否,也是影响测定结果准确与否的重要因素,当血液抽出注入抗凝管后,应立即充分颠倒混匀,以免产生凝块而影响测定。
抗凝剂的正确使用也是保证检测准确性的关键之一。因草酸盐或枸橼酸钠等抗凝剂可引起细胞的形态改变、影响红细胞的聚集性和变性能力,导致血粘度检测不准确。
目前认为,肝素作为血液的抗凝剂较为理想,它与血液的比例为31.25国际单位:1ml,即用肝素钠针剂2ml(12500单位)加蒸馏水8ml稀释至10ml,取其0.1ml放入100mm×15mm塑料试管中,置于37℃干燥箱待干备用,此抗凝管的抗凝血量为4ml,若抽血量过多、抗凝剂相对偏少、血液抗凝不完全,会出现小凝块,使全血粘度增高。因此,需要严格控制其比例。
2、室温及仪器温度的严格控制
温度对测定血液粘度、血沉结果影响很大。对正常血液与血浆来说,如果以37℃时的粘度为标准,则在37~15℃的范围内温度每降低1℃、粘度大约上升2~3%。我们曾做过试验,同一标本当仪器温度从37℃降至8℃时,其全血粘度测定值增加一倍左右,而血沉在温度高时沉降较快,温度低时沉降较慢。
因此,严格控制实验室温度达到规定要求的10~28℃、粘度仪本身温度37℃尤为重要。另外,抗凝血应放在37℃恒温水溶箱内预温再测定,由于抗凝血放置时间过长,全血中碳酸分解、二氧化碳分压降低、PH值发生改变,会造成测定误差,因此,测定应在4h之内完成,最长时间一般不超过6h。
3、加样的正确及管道的通畅
检测过程中由于标本多,标本放置后试管下部细胞下沉血液粘稠而上部细胞减少血流变稀,因此在加样时要特别注意将标本重新混匀后再吸取,以免造成全血粘度及红细胞压积的过高或过低,从而影响检测的结果;
检测加注血样时,除吸量的准确之处,还要注意加样的均匀和不产生气泡,否则会使粘度值偏高;
每天工作完毕应用稀释后的中性清洗剂清洗管道,然后用蒸馏水反复冲洗数次,再启动热风对测头进行干燥处理,使仪器保持管道通畅、测头清洁和干燥,为次日的工作做好充分准备,以确保测定的准确性。
4、仪器的标定和其它
仪器的标定是确保检测准确性和精确性的关键。虽然仪器在出厂时已用标准油作为标准物进行过标定,但经使用一段时间之后,由于磨损、磕碰等原因,会造成检测精确度降低。
因此,在工作中一般每隔一个月左右就要按仪器规定程序对仪器进行一次标定,使仪器测定的各切变率的粘度值与标准油的粘度值之间的误差均不超过3%,以保证仪器的标定的准确、确保检测结果的准确。与此同时,每隔一个月左右,我们还要对仪器的水平状态进行一次校正。
除此之外,我们还建立了仪器日维护、周维护和月维护等工作责任制,使仪器周围环境始终保持干净无尘、无强磁场干扰、无腐蚀物质等良好的工作状态。
由于在检测中认真做到了以上几点,因此,我院血流变室的血流变检测结果重复性较好、准确性较高,为临床提供的数据也是较为可靠的。
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