新的光散射体系测定蛋白质的研究

摘　要　以1 ,62己二胺二吖啶为荧光探针, 建立了一种新的蛋白质共振散射检测体系。实验考察了该吖啶荧光探针的共振散射特征光谱、散射反应稳定性, 研究了缓冲介质p H、探针浓度等参数对测定蛋白质的影响。结果表明, 当p H 819 时, 1 ,62己二胺二吖啶染料的散射波长为470 nm; 加入BSA , 反应约9 min 后, 体系光散射强度达到最大并维持稳定, 2 h 内无明显变化。当1 ,62己二胺二吖啶探针(浓度1100 ×10 - 4 mol ·L - 1 ) 用量为3100 mL 时, 蛋白质与1 ,62己二胺二吖啶的光散射增强作用显著, 共振散射强度随着BSA 的增加而明显增强, 光散射强度与蛋白质浓度成良好线性关系, 线性浓度范围为1100～5100μg ·mL - 1 , 检测限(3σ/ K) 为01085μg ·mL - 1 。测定了血清样品, 浓度为2100～4100μg ·mL - 1 , 回收率为9810 %～10117 % ,测定偏差小于117 %。