新型PCR分析方法毛细管PCR技术

新型PCR分析方法毛细管PCR技术

常规PCR反应采用导热性较差的塑料管作为反应容器，对于100~1样品，样品温度要比槽板温度滞后2030s，加上槽板升降温度较慢（1C／s），因此30个循环反应通常需要2～6h，循环时间多浪费在常规PCR反应采用导热性较差的塑料管作为反应容器，对于100~1样品，样品温度要比槽板温度滞后20—30s，加上槽板升降温度较慢（1’C／s），因此30个循环反应通常需要2～6h，循环时间多浪费在加热和冷却样品过程中，不能满足临床快速诊断的需要。

毛细管PCR由于采用导热性远强于塑料管的毛细管作为反应容器，使得样品温度滞后时间小于1s，对于扩增500bp的片段，延伸反应10s就可完成；对于 10／A1的样品，变性和复性均能在1s内完成；另外，毛细管PCR仪采用高速空气流作为加热和冷却的介质，保证了温度的均一性、温度的迅速变化及样品和 空气间的快速热传导，使得样品温度变化率可达5～10~C／s，因此毛细管PCR仪能够在短至15min内完成30个循环。而仪器方面则出现了相应的附件 用于承载装有样品的毛细管。

目前，PCR的发展主要集中在扩增条件的完善、扩增产物检测方法的改进和扩增产物由定性分析向定量分析转变上。