新色谱柱的活化与柱效测试

拿到一根新的色谱柱，首先要做的事情是查看色谱柱的说明书，了解色谱柱的基本信息，包括pH值范围、*高操作温度、最大操作压力等信息，再查看色谱柱柱效测试报告，准备柱效测试所用分析物及试剂，然后按以下步骤进行色谱柱活化及柱效测试：

1 液相连接二通，使用新鲜经过滤的水和乙腈或甲醇（根据测试报告中的流动相选择有机溶剂）冲洗液相系统，确保液相系统干净，不含任何缓冲盐和污染物。

2 将色谱柱入口端连接到液相系统上，柱出口端先不连接检测器，应直接连到废液收集器；色谱柱上有箭头标明正确方向，取用色谱柱时避免磕碰掉落。

3 在0.1ml/min流速下用乙腈（甲醇）或保存溶剂润洗色谱柱，最少2小时，或按照色谱柱说明书上的方法进行活化。

4 参照柱效测试报告中的方法，更换柱效测试所用流动相，缓慢调节流速至柱效测定流速，平衡色谱柱，至少5-10倍柱体积流动相（例如：250×4.6mm 的色谱柱柱体积为 4.2 ml，以 1 ml/min 流速10倍柱体积需要平衡 42 分钟），直至压力和基线稳定。

5参照柱效测试报告中的方法测试柱效，如果测试结果略低于测试报告，属于正常情况，如果结果明显偏低、峰形拖尾，说明所使用的色谱柱或液相系统处于非理想状态，需要进行排查。

6 记录测试方法及结果，并作为定期柱效测试的参考值。