月旭公司为您提供瘦肉精检测解决方案

　　盐酸克伦特罗是一种β-兴奋剂，20世纪80年代初，美国一家公司开始将其添加到饲料中，增加瘦肉率，但如果作为饲料添加剂，使用剂量是人用药剂量的10倍以上，才能达到提高瘦肉率的效果。它用量大、使用的时间长、代谢慢，所以在屠宰前到上市，在猪体内的残留量都很大。这个残留量通过食物进入人体，就使人体渐渐地中毒，积蓄中毒。如果一次摄入量过大，就会产生异常生理反应的中毒现象，因此而被禁用。国内养猪户不顾农业部的规定，为了使猪肉不长肥膘，在饲料中掺入瘦肉精。猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合成，加速脂肪的转化和分解，提高了猪肉的瘦肉率，因此称为瘦肉精。

　　自瘦肉精事件发生以来，月旭公司一直密切关注此事，迅速推出了动物组织中盐酸克伦特罗(瘦肉精)检测的全套解决方案。

　　具体测定方法如下：

　　1. 适用范围

　　适用于动物肌肉和肝脏中盐酸克伦特罗药物的检测。

　　2. 提取

　　将5g动物组织、15 mL乙酸乙酯、3 mL10%碳酸钠溶液置于50 mL离心管中，10000 rpm均质2 min。6000 rpm下离心2 min，将上清液转至另一离心管中。用15 mL乙酸乙酯重复提取一次，合并提取液。

　　向乙酸乙酯提取液中加入5 mL 0.1 mol/L的盐酸溶液，涡动1 min，然后再6000 rpm下离心1 min，收集下层水相。重复萃取一次，合并下层水相，用2.5 mol/L NaOH溶液调节pH至5.2，待净化。

　　3. 净化

　　活化/平衡：依次向Welchrom® P-SCX(60mg/3mL)中加入3 mL甲醇、3 mL水和3 mL 30 mmol/L盐酸溶液，流出液弃去;

　　上样：将上述提取液加入柱中，流出液弃去;

　　淋洗：依次用3 mL水、3 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去，并将小柱抽干;

　　洗脱：用2×2 mL 5% 氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，40℃下氮气吹干;

　　4. 检测

　　50% 甲醇溶解残渣，涡动振荡1 min,过0.22μm滤膜，装入进样小瓶，进样10μL分析。

　　色谱条件：

　　色谱柱： Ultimate XB-C18 液相色谱柱(4.6 mm x 150 mm, 3 μm)

　　流动相： 0.01 M磷酸缓冲液：甲醇=65:35

　　流速： 0.7 mL/min

　　进样量： 20 μL

　　柱温： 30 °C

　　检测波长： 244 nm

　　运行时间：11 min

　　5. 结果

　　回收率和重现性实验

　　将猪肝空白样品经过液液萃取初步处理后，分别添加一定量的标准溶液，添加浓度分别为0.5μg/kg、1μg/kg、5μg/ kg、每批次内同一浓度做3次平行实验，共3个批次(样品典型回收率色谱图见附图)。

　　猪肝脏中添加0.5 μg/ kg 盐酸克伦特罗的样品图谱

　　本方法中使用到得耗材：

　　1. 固相萃取小柱 Welchrom P-SCX 60mg/3mL (P/N:WSP020306)

　　2. 色谱柱：Ultimate XB-18,50*2.1mm，3μm(P/N:Ult3B18205)

　　3. 13mm，孔径0.22μm尼龙针孔滤膜(P/N: WEL-SFNY213022)

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