则责任自负

2018年,PubMed 中共有194,262 篇蛋白相关的论文,其中有16,196(8.3%)篇用到了 WB。WB 的使用比例在过去30年中稳定在8%到9%左右,而更为现代和准确的蛋白质谱技术(MS),在过去十年中应用比例则稳定在4%,仅仅是WB的一半。四十年后的今天,WB依旧是应用率最高的蛋白质分析技术。但是重现性和稳定性的问题,也使Western Blot技术处在风口浪尖上。因此2014年,美国国立卫生研究院提倡提高科研重现性,呼吁研究界、科学出版商、大学、工业界和其他领域推动这一变化。率先响应的期刊有Science,Cell,Nature和JBC。那让我们来看看期刊都有哪些具体要求:

一、不建议跑平行胶,因为平行胶和剥离膜孵育体系,操作条件的不一致,影响定量的准确性,因此最好内参和目的蛋白要在同一张印迹膜上。

二、选择宽动态范围的方法,确认信号强度与所上样量之间的线性关系,例如用胶片做化学发光方法的动态范围就很窄,不建议使用。

三、强烈推荐使用总蛋白进行归一化,因为看家蛋白容易受处理条件影响而发生变化,影响定量的结果,使用总蛋白定量更真实地反映目标蛋白表达量的变化。

四、提交原始数据,例如:JBC,PLOS和CELL等杂志都要求要提供原始数据。

Azure Sapphire多光谱激光成像系统如何满足期刊要求

☑ Sapphire是多荧光检测系统,可多达4个激光光源,同时进行4通道荧光检测,获得更快的工作流程和更可靠的定量数据。
☑ Sapphire配合AzureRed总蛋白荧光染色剂可以做总蛋白归一化和定量三个靶标蛋白,生成可以信赖的定量Western Blotting数据。
☑ Sapphire配有独特的三种检测器设计,最大限度地提高仪器的检测动态范围,保证结果的准确性。☑
Sapphire提供原始数据16bit的tiff图给到期刊,这里的tiff原始数据是指未经裁剪,像素修改,对比度调整等任何操作的图,保证结果的真实性和可靠性。

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一、原理一个基因表达的最终产物是产生相应的蛋白,因此检测蛋白是测定基因表达的主要标志。 原理:WesternBlotting是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙稀酰胺......
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科学家经常通过蛋白质的表达及修饰情况来揭示对应样品的生理或病理状态。WesternBlot是进行蛋白检测的最经典技术。核酸检测对样品量的要求极低,因为DNA或RNA具备体外扩增的性质。而蛋白质检测只能......
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