果蝇唾腺染色体

1．练习取出果蝇幼虫的唾腺和制作唾腺染色体标本的方法与技术。

2．观察和识别多线染色体的特征：

a．巨大，多线；

b．染色体配对，染色体只有体细胞的半数(n)；

c. 染色体含异染色质多的着丝粒部分互相靠 拢 ，形成染色中心(chromo center) ；

d．横纹有深、浅、疏、密不同，而且各自对应排 列，这意味着基因的排列。

双翅目昆虫(果蝇、摇蚊等)幼虫期的唾腺细胞很大，其核内的染色体称为唾腺染色体(Salivary chromosome)。由于它们比普通染色体大100-150倍，宽约5μm，长约400μm，因而也称为巨大染色体(giant chromosome)。另外唾腺染色体经多次复制(212=4096)而不分开，所以又称作多线染色体(polytenic chromosome)。唾腺染色体经染色后出现深浅不同，疏密有别的横纹，这些横纹的数目和位置常常是恒定的，标志着物种的特征。当染色体上有结构畸变，如缺失、重复、倒位、易位等，很容易在唾腺染色体上鉴别。

实验器具： 解剖镜、显微镜、解剖针、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸。

实验药品： 0.7％生理盐水、1mol盐酸、 蒸馏 水、改良品红。

1．把载坡片放于解剖镜载物台上(用黑背景)加上—滴生理盐水，把果蝇三龄幼虫移入其中，左手持解剖针按住幼虫前端1／3处固定幼虫，右手持另一解剖针按住幼虫头部，果断、快速、有力地向右拉，把虫体前端扯断，唾腺随之露出。唾腺呈半透明，球棒状，前端较细，后端粗钝，有时成对粘在一起成“V”字型，其外侧有时附有乳白或淡黄色的脂肪， 此时应保留唾腺形态的完整，因为食道和肠管也是半透明的，如果唾腺不完整，就很难判断唾腺和肠道的取弃。

2．把唾腺剔出移到玻片的干净处，并清除其余器官和组织。如果唾腺上附有脂肪，应把乳白色或淡黄色的脂肪清除干净，保留半透明的唾腺。

3．把多余的生理盐水用吸水纸吸干，加一滴 1mol盐酸；室温下水解2分钟，然后吸干。

4．用 蒸馏 水一滴，清洗吸干2次。吸水纸不要太靠近标本，以免标本丢失。

5.加一滴改良苯酚品红，染色3－5分钟。染色的同时，用镊子把唾腺稍捣碎。

6.用镊子取一盖玻片，以45。角徐徐落下，排净气泡，取少许吸水纸铺在盖玻片上，用左手食指和拇指固定盖玻片位置，右手拇指使劲按压。为使染色体铺展得舒张，可站起来把上半身的体重施于右拇指上，效果会更好。

蛹及三龄幼虫、

果蝇三龄幼虫

挑取果蝇唾液腺

挑出唾液腺

唾腺与肠道的区别

果蝇唾腺

加入盐酸后的唾腺

果蝇唾腺染色体

果蝇唾腺染色体模式图

1．先用100X镜观察片子，找到铺展较好的染色体图像后，将其移动至视野中心，再用400X镜观察。