染色体结构变异实验

实验方法原理：染色体结构变异主要有缺失、重复、倒位、易位四种。其发生过程是由于同源染色体或非同源染色体之间发生断裂，然后发生错误重接的结果。各种结构变异的杂合体，在细胞分裂过程中常常表现不正常的细胞学行为，可以进行细胞学鉴定。在减数分裂过程粗线期，可以观察到缺失杂合体的“缺失环”，重复杂合体的染色体突出的环或瘤，倒位杂合体的“倒位圈”或者后期的染色体桥，易位杂合体的“十字形”联合或者终变期“四体环”“四体链”“8字形环”。在有丝分裂细胞中可见到后期的染色体桥，染色体断片，以及间期的细胞核显出现“微核”等。

染色体结构变异一般可导致花粉和胚珠的部分不育，或者半不育，产生遗传性状的变异，以及假显性，假连锁、剂量效应、位置效应等等改变基因连锁关系遗传后果，严重的可造成个体死亡。通过染色体行为观察和遗传效应实验相互印证，鉴别染色体结构变异的类型。

实验材料：蚕豆

试剂、试剂盒：

醋酸洋红                                                                 

改良苯酚品红                                                                  

无水酒精                                                                  

70％酒精                                                                  

盐酸 

仪器、耗材：

显微镜                                                                  

培养箱                                                                  

分析天平                                                                 

水浴锅                                                                  

酒精灯                                                                  

剪刀                                                                 

镊子                                                                  

解剖针                                                                  

载玻片                                                                  

盖玻片                                                                  

滤纸                                                                 

铅笔                                                                 

标签纸                                                                 

胶水 

实验步骤：

一、材料和器材

1、实验材料：

蚕豆（vicia faba, 2n＝12）干种子

2、实验仪器及用具：

显微镜、培养箱、分析天平、水浴锅、酒精灯、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、铅笔、标签纸、胶水

3、药品和试剂：

醋酸洋红、改良苯酚品红、无水酒精、70％酒精、1N盐酸、

二、实验方法和步骤

1、材料准备

选购具强生活力的蚕豆干种子，经45格伦钴60照射（或用植物诱变剂等）处理后。浸种24小时，然后置搪瓷盘上摊平催芽，上盖三层纱布保温，于20℃上培养，待根长1~2厘米时，切取顶端根尖5毫米左右于卡诺氏固定液0.5小时，然后换入70％酒精保存备用。

2、解离

取出经固定的备用根尖，切取具分生组织部分约1~2毫米，（去除根冠和伸长区细胞）置1NHCl中解离10－20分钟。然后用蒸馏水洗尽材料上盐酸，准备制片和染色

3、染色制片

取一枚经解离的蚕豆根尖，置载玻片正当中，两片载玻片呈十字形对压，然后揭开，在有材料的部位各滴上一小滴染色（醋酸洋红或改良苯酚品红），再用盖玻片压片（见实验一）。

4、镜检：

观察有丝分裂细胞后期的染色体桥和染色体断片，间期细胞的微核。