实验方法原理:染色体结构变异主要有缺失、重复、倒位、易位四种。其发生过程是由于同源染色体或非同源染色体之间发生断裂,然后发生错误重接的结果。各种结构变异的杂合体,在细胞分裂过程中常常表现不正常的细胞学行为,可以进行细胞学鉴定。在减数分裂过程粗线期,可以观察到缺失杂合体的“缺失环”,重复杂合体的染色体突出的环或瘤,倒位杂合体的“倒位圈”或者后期的染色体桥,易位杂合体的“十字形”联合或者终变期“四体环”“四体链”“8字形环”。在有丝分裂细胞中可见到后期的染色体桥,染色体断片,以及间期的细胞核显出现“微核”等。
染色体结构变异一般可导致花粉和胚珠的部分不育,或者半不育,产生遗传性状的变异,以及假显性,假连锁、剂量效应、位置效应等等改变基因连锁关系遗传后果,严重的可造成个体死亡。通过染色体行为观察和遗传效应实验相互印证,鉴别染色体结构变异的类型。
实验材料:蚕豆
试剂、试剂盒:
仪器、耗材:
实验步骤:
一、材料和器材
1、实验材料:
蚕豆(vicia faba, 2n=12)干种子
2、实验仪器及用具:
显微镜、培养箱、分析天平、水浴锅、酒精灯、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、铅笔、标签纸、胶水
3、药品和试剂:
醋酸洋红、改良苯酚品红、无水酒精、70%酒精、1N盐酸、
二、实验方法和步骤
1、材料准备
选购具强生活力的蚕豆干种子,经45格伦钴60照射(或用植物诱变剂等)处理后。浸种24小时,然后置搪瓷盘上摊平催芽,上盖三层纱布保温,于20℃上培养,待根长1~2厘米时,切取顶端根尖5毫米左右于卡诺氏固定液0.5小时,然后换入70%酒精保存备用。
2、解离
取出经固定的备用根尖,切取具分生组织部分约1~2毫米,(去除根冠和伸长区细胞)置1NHCl中解离10-20分钟。然后用蒸馏水洗尽材料上盐酸,准备制片和染色
3、染色制片
取一枚经解离的蚕豆根尖,置载玻片正当中,两片载玻片呈十字形对压,然后揭开,在有材料的部位各滴上一小滴染色(醋酸洋红或改良苯酚品红),再用盖玻片压片(见实验一)。
4、镜检:
观察有丝分裂细胞后期的染色体桥和染色体断片,间期细胞的微核。
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