柱前衍生高效液相色谱法测定肝纤维化兔给药后尿羟脯氨酸含量

《分析化学》2008年06期    
 
  柱前衍生高效液相色谱法测定肝纤维化兔给药后尿羟脯氨酸含量
  夏莉;梁逸曾;王平
  　　建立了一种快速测定羟脯氨酸的反相高效液相色谱法(RP-HPLC),并测定了血吸虫病肝纤维化兔给药中药复方口服液(HDS)前后尿液中羟脯氨酸含量变化。采用9-芴基甲氧基羰酰氯(FMOC)为衍生试剂,以3,4-脱羟脯氨酸为内标,在Zorbax SB-C18柱上用甲醇和醋酸钠缓冲溶液为流动相进行梯度洗脱,二极管阵列检测器(DAD)262nm处检测。羟脯氨酸在5.0~200μmol/L浓度范围内呈良好线性相关系(r=0.9999),方法检出限为2.0μmol/L(S/N=3),回收率为96.5%~99.0%。本方法具有样品处理步骤简单、准确度高、重现性好、分离时间短等优点,适合大批量样品测定。
【作者单位】：中南大学化学化工学院中药现代化研究中心 长沙410083
【关键词】：羟脯氨酸;9-芴基甲氧基羰酰氯;柱前衍生;高效液相色谱法;肝纤维化
【基金】：国家自然科学基金(No.20235020);科技部国际科技合作项目(No.2007DFA41090)资助
【分类号】：R285
【DOI】：CNKI:SUN:FXHX.0.2008-06-027
【正文快照】：
　　1引言羟脯氨酸在胶原蛋白的含量约为14%,是胶原蛋白特有成分,测定组织或血、尿中的羟脯氨酸含量已作为人体胶原蛋白代谢的生化指标,被认为是评估胶原蛋白含量和肝纤维化程度的指标[1],并开始作为抗肝纤维化药物疗效的考核指标,为抗肝纤维化药物的研制与疗效评价提供一种重要手