梅毒的实验室检测方法（一）

在梅毒的诊断治疗中，梅毒的实验室检测结果起到了很重要的作用，具有决定性的意义，下面就梅毒的检测方法做一个简单的介绍。

一、梅毒常用的检测方法

梅毒一般常用的检测方法是两种：病原学检测，血清学检测。

两种方法检测的标志物不同，病原学检测的直接检测梅毒螺旋体，而血清学检测是检测血液或者组织液中的梅毒抗体；两种方法各有优缺点，针对不同的感染情况，采用最合适的检测方法，就能够起到及时诊断治疗，对治疗的时机和效果有着重要的意义。

二、病原学检测

病原学检测是直接检测组织液中的梅毒螺旋体，是一种小而纤细的螺旋状微生物，因其透明不易染色，故称为苍白螺旋体，长度为8μm～20μm，平均8μm～10μm，直径<0.2μm,有6～12个螺旋。

梅毒螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳方法，也通过羊膜穿刺术获得孕妇的羊水作暗视野显微镜检查，对先天梅毒具有诊断价值。

原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。

检测主要有几种方法：暗视显微镜检查，镀银染色法，直接荧光法。用暗视野检查法检查病损内的梅毒螺旋体，这是一种最可靠的简单而常用的方法；免疫荧光检查法是一种可区别病损中的螺旋体是梅毒螺旋体或其他非致病螺旋体的方法，此法同样具有特异性；而银染色法是一种可显示内脏器官及皮肤损害中螺旋体的方法，但腐生螺旋体也可染色，因此是非特异性染色法。一般常用的是采用暗视显微镜检查。

暗视野映光检查是采用一个特殊的聚光器，中央为黑漆所遮蔽，光线只可从其圆周边缘斜射到载玻片上。倘若斜射光线遇到载玻片上的物体，如螺旋体等，由于菌体和周围液体折光率不同，引起散射的光线可通过镜筒达到观察者。因此，物体在暗视野内发光显现。

暗视野显微镜检查、镀银染色和荧光抗梅毒螺旋体单克隆抗体等检查方法，直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。暗视野显微镜检查已被世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。

螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳方法，对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。

但如未检测出梅毒螺旋体，也并不能排除患梅毒的可能性，可能是由取材不当或皮损处螺旋体数量不足，或患者使用过抗菌素，损害已接近自然消退等原因引起。可让患者复查及进行血清学检查。。

三、血清学检测

梅毒的血清学检测是梅毒诊断和抗生素治疗后疗效评估的主要手段，目前大部分医疗机构基本上都是采用此种方法对梅毒进行诊断治疗。

梅毒的抗体检测分为非梅毒螺旋体抗原血清学试验和梅毒螺旋体抗原血清学试验两种。

1、非梅毒螺旋体抗原血清学试验：主要有性病研究实验室试验（VDRL），不加热血清反应素试验(USR)，快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）。

试验的原理：梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主可对螺旋体表面的脂质作出免疫应答，产生抗类脂抗原的抗体（非特异性抗体），试验试剂的基本成分是心磷脂、卵磷脂和胆固醇，抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见。

VDSL：二十世纪50、60年代最为常用的梅毒血清学试验，所用的抗原是从牛心中提取的心磷脂和从鸡蛋黄中提取的卵磷脂及胆固醇等有效成分，梅毒螺旋体在破坏机体组织的过程中，体内释放一种心磷脂抗原，这种抗原可**机体产生相应的抗体即反应素，其与牛心中提取的心磷脂在体外可产生免疫结合反应，试验中所用的卵磷脂的作用是加强心磷脂的抗原性，胆固醇可增强抗原的敏感性。

此方法是唯一推荐检测脑脊液反应素的方法，用于神经梅毒脑脊液检测特异性高，检测阳性可以作为神经梅毒确诊依据，但敏感性较低，即检测阴性不能排除神经梅毒。

此试验有几个明显的缺点，抗原需要每天配制；血清标本要加热灭活处理；需在显微镜下观察结果。因此，后来又推出了改良的USR和RPR等方法。

USR：对VDRL抗原进行了改良，其将VDRL抗原用稀释液稀释后，再将该抗原悬液离心，然后在沉淀物中加入含有EDTA-Na2、氯化胆碱和防腐剂的一定量的缓冲液，EDTA可使抗原半年内不变性，氯化胆碱对补体有化学灭活作用，从而使用时无需每天配制抗原及血清加热灭活处理。

RPR:是在上述USR抗原的基础上加入一定量特制的活性炭颗粒，实验在特制的白色纸片卡上进行，从而使得抗原抗体反应在白色底板上出现黑色的凝集颗粒而可用肉眼观察，结果容易判断,直接用肉眼而不需要用显微镜观测结果。

TRUST：该方法是在抗原试剂中加入特制的染料甲苯胺红,由于甲苯胺红是化学染料，颗粒均匀，生产的批间差异小，结果易于观察。

TRUST是目前最为常用的梅毒筛查方法。

临床意义：非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好，可作为梅毒筛查试验。因治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征；结合梅毒螺旋体抗原血清学试验，可以鉴别梅毒现症感染和既往感染。

几种方法的敏感性和特异性都基本相似。

非梅毒螺旋体抗原血清试验敏感性和特异性