植物组织培养基配置的几个关键环节

以MS培养基为例,其母液的配制包括大量元素、微量元素、铁盐、维生素、氨基酸、植物生长调节物质和有机附加物等种类。

1 大量元素和微量元素母液的配制

按规定用量,称取所需的各种药品,在配制时为减少工作量,可以把几种药品（如大量元素或微量元素）配在同一母液中。但由于各种药品的混合,可能发生反应,生成沉淀物,以致母液失效。为避免类似现象发生,在大量元素、微量元素和维生素及氨基酸的母液配制时,可采用如下2种做法加以解决：①将要配在同一母液的大量元素、微量元素和维生素及氨基酸等化合物,按先后顺序溶解药品,待前一种药品完全溶解后再加入后一种化学药品,以此类推；②使每种成份分别完全溶解,再把它们彼此混合。

2 铁盐母液的配制

铁盐的成份含硫酸亚铁（FeSO₄·7H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na₂-EDTA）。这两种化合物的溶解和混合较为严格,必须按如下方法配制,否则将会产生沉淀。该方法是：分别溶解FeSO4·7H2O和 Na2-EDTA,加热并不断搅拌,使之完全溶解,冷却,将2种溶液混合,调PH至5.5,用蒸溜水加至所需容积,棕色瓶保存于冰箱之中。

3 植物生长调节物质母液的配制

植物生长调节物质是培养基的重要组分之一,一般是植物激素类物质,如生长素类的IAA、IBA、NAA,赤霉素类的GA3,细胞分裂素类的2,4-D、KT和6-BA等。由于大多数生长调节物质难溶于水,因此配制方法也各不相同：①IAA,IBA和GA₃先用少量95%酒精溶解,再加水定容,摇匀后贮于试剂瓶中、贴上标签后,存放在冰箱中；②NAA可用热水或少量95%酒精溶解,再加水定容至所需容积；③2,4-D可溶于少许1mol/L的NaOH溶液中,然后加水定容；④KT和6-BA可用少量1mol/L的HCl溶解,再加水定容；⑤玉米素先溶于少量95%酒精中,然后加水定容。

植物生长调节物质浓度通常用ppm（mg/ml）和mol/L表示,在配制母液时,常以ppm较为方便,一般配制成0.5ppm的母液,这个浓度既便于计算,也可避免冷藏时形成结晶。

4 有机附加物母液的配制

在植物组织培养时,培养基中往往要加入一些有机附加物,如椰子汁,以促进组织培养活性。由于椰子汁的活性成分是耐热的,在配制时,要先把由果实中采集到的汁液加热煮沸以除去其中的蛋白质,过滤,然后置塑料瓶中贮存于的-20℃的低温冰箱内。