植物细胞分裂素的保绿与阻止衰老的作用实验

实验方法原理：在植物中广泛存在细胞分裂素。它能促进细胞分裂，抑制核酸酶，蛋白酶等一些水解酶的活性，使大分子物质少受破坏。用细胞分裂素处理正在衰老的叶片，能阻止叶绿素的破坏，延长叶片寿命。

把植物的离体叶片放在适宜浓度的细胞分裂素溶液中，置于25－30℃黑暗条件下，叶片中叶绿素的分解比对照慢，证明分裂素具有保绿作用。

实验材料：小麦幼苗

试剂、试剂盒：

激动素溶液

丙酮 

仪器、耗材：

培养皿                                                                  

量筒                                                                                                                                 

药物天平                                                              

小漏斗                                                                  

小剪刀                                                              

容量瓶                                                                 

研钵                                                                  

滤纸                                                                  

721分光光度计

实验步骤：

一、材料与设备

小麦幼苗

直径8cm 培养皿，10  ml 量筒，100  ml 量筒，药物天平，小漏斗，小剪刀，25  ml 容量瓶，研钵，滤纸，721分光光度计

药品

100pp M 激动素溶液：10毫克激动素用少量0.1N HCl溶解，用蒸馏水定容至100  ml 。

丙酮，0.1NHCl，80%g丙酮。

二、实验步骤

1．在7个培养皿中分别加入蒸馏水和0.05pp M ，0.5pp M ，5pp M ，50pp M 的激动素溶液各10  ml 。每一处理重复3次。

2．选生长一致的小麦幼苗，剪下第一完全叶，切去尖端1.5cm ，取其后3cm 长的切断。向每一培养皿放进此切断0.500-1.000克。然后将培养皿放在散射光下培养1－2周。

3．从培养皿中取出小麦叶片，用滤纸吸干水分，放入研钵中。再向研钵中放入少量石英砂，少量碳酸钙以及4－5  ml 80%丙酮，仔细研磨成浆，过滤到100  ml 容量瓶中，研钵用80%丙酮4－5  ml 洗两次，洗出液过滤。滤渣和滤纸再放入研钵中，研磨，过滤。如此反复，直到滤出液无绿色。滤液用80%丙酮定容至100  ml 。

4．将721分光光度计灵敏度转在3的位置，以80%丙酮为空白对照，在663n M 和645n M 处比色。

三、结果

叶绿素浓度按下式计算：

〔ch1〕=20.2×D645+8.02×D663

〔ch1〕=叶绿素浓度，单位 M g/升。

D645：叶绿素溶液在645n M 处的消光值。

D663：叶绿素溶液在663n M 处的消光值。