发布时间:2023-03-17 20:45 原文链接: 概述吸附色谱分离方法的建立

  吸附色谱在色谱分离中占有非常重要的地位,只要吸附剂和流动相选择得当,几乎可以用来分离所有类型的化合物。目前大多数液一固色谱分离都是以全多孔硅胶为固定相。考虑到柱子的耐久性和可靠性,在常规工厂生产控制和不太困难的分离中,用薄壳型硅胶柱往往是更好的选择,因为薄壳填料柱易于制备、不容易堵塞,并且容易平衡和再生。对于大量样品的制备分离,通常采用50μm粒径的多孔硅胶柱。

  若各种流动相使用无效或样品在硅胶柱中发生反应或损失时,可更换为氧化铝柱,以改变选择性。如分析碱性样品时,一般用氧化铝柱。

  在吸附色谱分离中,需要选择的第二个条件是流动相。在确定了具有适当强度和选择性的溶剂之后,就可以使用吸附色谱来分离样品。对于ε0>0.1值(ε0是溶剂的强度参数,它的物理意义是在特定吸附剂上单位面积溶剂的吸附能)的非水溶性溶剂,可使用50%水饱和的流动相。对于较弱的流动相,可加入0.02~0.1体积的乙腈代替水。而对于水溶性流动相,可加人0.05~0.2体积的水。

  关于样品量,在使用全多孔硅胶柱时,每g吸附剂可注入多达1 mg的样品。但对于高效柱来说,当样品量大于50 μg/g时。就可能对分离造成影响。对于容量较小的高效柱(15x0.5 cm,5μm),进样量一般为25~50μL,而对于较长和较粗的柱子进样量为50~400μL。除此之外,还要考虑温度的影响,如果保留时间必须控制在严格的范围之内,柱子应恒温在室温附近 [1] 。