氨基酸、蛋白质的性质

实验概要

熟悉氨基酸主要的化学性质；了解蛋白质的基本结构和重要的化学性质；掌握鉴别氨基酸和蛋白质的方法。

主要试剂

1. 蛋白质溶液

2. 5%硫酸铜

3. 0.5%甘氨酸

4. 0.5%酪氨酸

5. 米隆试剂

6. 0.5%苯丙氨酸

7. 饱和硫酸铵

8. 5%碱性醋酸铅

9. 1%硫酸铜

10. 0.5%苯酚

11. 5%甘氨酸等

主要设备

1. 常用仪器

2. 水浴锅

实验步骤

1. 盐析试验

取一支试管，加入蛋白质溶液20滴，再加入20滴饱和硫酸铵溶液，振荡后析出蛋白质沉淀，溶液变混浊。取混浊液10滴于另一试管中，加入蒸馏水2mL，振荡后观察现象。

2. 醇对蛋白质的作用

取10滴蛋白质溶液于试管中，加入10滴95%乙醇，振荡，静置数分钟 ，溶液混浊，取混浊液10滴滴于另一试管中，再加入蒸馏水1mL，振摇，观察现象，与盐析结果比较。

3. 蛋白质与重金属盐作用

取2支试管，各加入蛋白质溶液10滴，再在其中一支试管中加入5%碱式醋酸铅溶液1滴，另一支试管中加入5%硫酸酮溶液1滴，立即产生沉淀(切勿加过量试剂，否则，沉淀又复溶解)。再用水稀释，观察沉淀是否溶解，与盐析结果作比较。(本试验可用5%甘氨酸溶液作对比试验)

4. 蛋白质与生物碱试剂作用

取2支试管，各加入l0滴蛋白质溶液和2滴醋酸，一管加入饱和苦味酸2滴，另一管加入5%单宁酸2滴。观察有无沉淀生成。

5. 茚三酮试验

取2支试管，分别加4滴蛋白质溶液和4滴0.5%甘氨酸溶液，再分别加入3滴0.1%茚三酮溶液，混合后，放在沸水浴中加热1-5分钟，观察并比较两管的显色时间及颜色情况。

6．二缩脲试验

取2支试管，分别加入10滴蛋白质溶液、0.5%甘氨酸溶液，再各加入l0滴10%氢氧化钠溶液，混合后，再分别加入1-2滴1%硫酸酮溶液(勿过量)振荡后，观察现象，比较结果。

7. 黄蛋白试验

取一支试管，加入5滴蛋白质溶液及 2滴浓硝酸，出现白色沉淀或浑浊，然后加热煮沸，观察现象，反应液冷却后再滴入10%氢氧化钠溶液至反应液呈碱性，观察颜色变化。

8. 米隆 (Millon)试验

取4支试管，分别加入20滴蛋白质溶液，10滴0.5%苯酚溶液，10滴0.5%酪氨酸溶液和 10滴 0.5%苯丙氨酸溶液，再分别加入5-10滴米隆试剂，振摇，观察现象。再将试管置于沸水浴中加热 (不要煮沸，加热勿过久，否则颜色消退)，再观察现象。

9. 蛋白质的碱解

取1mL蛋白质溶液放在试管里，加入2mL30%NaOH溶液，把混合物煮沸2-3分钟，此时析出沉淀，继续沸腾时，沉淀又溶解，放出氨气(可用红色石蕊试纸放在试管口检出之)。

向上面的热溶液中加入lmL 1O%硝酸铅溶液，再将混合物煮沸，起初生成的白色氢氧化铅沉淀溶解在过量的碱液中。如果蛋白质与碱作用有硫脱下，则生成硫化铅，结果清亮的液体逐渐变成棕色。当脱下的硫较多时，则析出暗棕色或黑色的硫化铅沉淀。