流式细胞术数据分析知识汇总（二）

5、常见荧光素

根据激光及滤光片选取流式抗体染料

6、常见的荧光素染料组合

7、举例：

8、双或多参数荧光抗体的标记组合

1）单染

2）双或多染

空白对照（未染色细胞）：用以区分细胞的自发荧光和特异性荧光，避免假阳性的结果。

同型对照：使用与实验抗体相同种属来源、相同剂量及同种免疫球蛋白的相同亚型的抗体作为对照，用于消除抗体非特异性结合到细胞上而产生的背景荧光。

对于流式样本，由于细胞的自发荧光、荧光抗体会与待测标本中的细胞发生少量非特异性结合，在流式细胞仪上可检出一定的信号，这部分信号称为基础荧光阈值。

在流式标本检测的过程中，通常通过调节电压将阴性细胞的基础荧光域值于95%或99%的置信区间内，作为阴性对照可信区间设定。大于阴性置信区间的荧光信号为特异性荧光信号。

注意：流式图中的颜色为区分不同细胞群而人为设定，与荧光无关

1）红色线：空白对照；

2）绿色线：阴性（同型）对照，（P2区域即为阴性区域）

3）蓝色线为实验组。

1、单参数直方图

以分布直方图来显示，横轴为该参数测量强度的相对值，单位是道数，可以是线形或者对数。纵轴一般是相对细胞/粒子数。

横轴：参数测量强度的相对值；

纵轴：相对细胞（粒子）数

细胞DNA含量的检测（细胞周期分析）