实验概要
从海马体中分离到神经元细胞，然后进行培养细胞以便进行其他的实验研究。
主要试剂
解剖液
MEM
HBSS
主要设备
L-多聚赖氨酸包被的平皿或盖玻片
实验材料
出生24h内的乳鼠
实验步骤
1. 用冷却的解剖液（0℃，最高2-3℃）冲洗海马两次。
2. 在冷却解剖液（2-3℃）中解剖无脑膜的海马。
3. 加入胰蛋白酶（调整终浓度为0.25%），在15毫升Falcon管中37°处理15分钟。一般10至20个海马用溶液5毫升。
4. HBSS或MEM溶液洗两次，停止消化。
5. 用1至3毫升含10%胎牛血清的MEM溶液重悬。
6. 用1000mL的微量移液器吹打混匀（10次左右）。
7. 等待1-2分钟，待未消化的海马组织沉至底部后，吸取已消化的细胞转移到新的管中。向未消化的组织中加入2毫升的HBSS，并通过巴斯德管的处理直到组织完全分离，并将消化的细胞转至同一管中。
8. 计数细胞的数量。
9. 用培养基将神经元细胞稀释到所需浓度。将细胞移至多聚赖氨酸处理过的平皿或盖玻片上。并依照平皿或盖玻片的大小优化细胞数量。例如，2mL密度为300 000-400 000每毫升的细胞液，可以培养在35毫米平皿上。
10. 在没有胶质细胞饲养层的情况下，细胞在37℃，5%二氧化碳和含10% Nu-血清的组织培养基中培养。
注意事项
1. L-多聚赖氨酸（0.1mg/ml）包被培养板后，因为对神经元有毒性，要待其干后才能接种。可以回收再利用。
2. 取脑组织时动作要尽量快，保持低温操作。
3. 分离皮层和海马时，尽量少残余血管和脑膜，否则会培养大量的成纤维细胞。
4. 接种细胞后24h内勿移动，以防影响贴壁。
血清采集完成后，通过冷冻的方式运输到加工工厂。到达工厂后，先进行解冻，随后对血清进行一系列检测，包括细菌、病毒、内毒素以及血红蛋白含量等多项指标的检测。在检测过程中，会筛选出最优质的血清，并将其置于无......
建议将血清储存于-20°C，这一温度条件下，血清在冻存状态时最为稳定。不推荐将血清存放在无霜冰箱中，因为无霜冰箱的温度循环可能会导致瓶体破裂，进而使产品受到污染或发生变质。......
胎牛血清与小牛血清的来源存在差异，胎牛血清是通过从尚未出生的胎牛心脏穿刺采血而获得的，而小牛血清则是从出生后1年内的小牛体内通过静脉采血得到的。由于它们的供体牛龄不同，因此两者所含的促细胞生长因子、促......
为什么细胞培养中需要添加血清呢？血清通常以2-10%的浓度添加到培养基中，为细胞提供全面的营养成分、激素、生长因子以及附着因子。此外，血清还能够作为细胞培养系统的缓冲成分，防止pH值变化、蛋白水解活性......
在细胞培养实验中，血清的使用是关键环节之一，其保存、解冻和灭活操作的正确性直接影响细胞的生长状态和实验结果的可靠性。以下是血清保存、解冻与灭活的操作流程，供实验人员参考：一、血清保存方法1、长期保存温......
在细胞培养里，血清为细胞的生长、增殖和维持生理功能提供了不可或缺的支持。然而，血清种类繁多，各有特点，适用于不同的细胞培养需求。本文将为您详细介绍血清的各类成员，帮助您在细胞培养中做出更合适的选择。一......
在细胞培养的世界里，血清的选择绝对是个关键环节。它就像是给细胞准备的“营养套餐”，直接影响细胞的生长、繁殖和健康。今天，我们就以牛源血清为例来好好聊聊，如何在众多血清中挑出最适合的那一款。一、牛源血清......
细胞培养是现代生物学研究中一项重要的技术，广泛应用于基础研究、药物开发、疾病模型构建等领域。在细胞培养过程中，血清是不可或缺的关键成分之一。血清是一种复杂的生物液体，含有多种生物活性物质，能够为细胞提......
近日，中国工程院院士、中国海洋大学教授薛长湖团队首次成功制备了厘米级细胞培养鱼肉，相关研究性论文发表在国际食品Top期刊《农业与食品化学杂志》。随着环境污染、粮食短缺、人畜共患疾病、动物福利和可持续发......
科学家们已经成功地大规模生产了实验室培养的脂肪组织，这反映了自然衍生的动物脂肪的纹理和组成。最近发表在《eLife》杂志上的这一发现可用于制造细胞培养的肉类，增强其质地和味道，使之与传统肉类非常相似。......