液相色谱保养知识

1、  色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死(如ACN适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相)

2、  对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。

3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。

4、带seal-wash的1100，要配制90%水+10%异丙醇，以每分2—3滴的速度虹吸排出，溶剂不能干涸。

5、其它主意事项见说明书，或由现场工程师介绍。维护保养知识问答

为什么溶剂和样品要过滤?

溶剂和样品过滤非常重要，它会对色谱柱、仪器起到保护作用，消除由于污染对分析结果的影响。

色谱柱：由于填料颗粒很细，色谱柱内腔很小，溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。

仪器：溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损，同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。样品过滤头的类型：

30mm内径：适用于大进样量的过滤，由0.2μm和0.45μm两种规格，材料有纤维素，醋酸纤维，聚四氟乙烯。处理样品体积少于50μl。

13mm内径：适用于范围广的过滤，由0.2μm和0.45μm两种规格，材料为纤维素。

3mm内径：适用于小进样量的过滤，由0.2μm和0.45μm两种规格。处理样品体积为7μl。

滤膜类型：

1．聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐，并无任何可溶物。

2．醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶液，推荐用于蛋白质和其相关样品。

3．尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可用于强酸，70%乙醇、二氯甲烷、不适用于二甲基甲酰胺。

4．再生纤维素滤膜：具有蛋白吸收低，同样适用水溶性样品和有机溶剂。

为什么HPLC用缓冲盐时要加在线Seal-wash选项？

HPLC用缓冲盐时，由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象，析出的细小盐粒非常坚硬，它附着在蓝宝石活塞杆上，随着蓝宝石活塞杆的往复运动，容易产生划痕，并磨损密封垫，造成漏液等故障现象。在线Seal-wash选项能有效的带走可能存在的缓冲盐结晶。缓冲盐的浓度在0。1mol或大于0。1mol时，必须使用该在线冲洗选项。