液相色谱常见问题及处理办法

一、问：用HPLC进行分析时，保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？

关于漂移问题：

1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。

2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。

3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。

关于快速变化问题：

1． 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定。

2． 泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。

3． 流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合。

二、问：色质联用中毛细柱的选择应注意什么问题？

1． 柱效要高

2． 热稳定性好

3． 化学惰性强

具体选择应注意：

1． 柱极性。根据分析样品选择不同极性的柱子进行分析。

2． 柱子内径。内径大小决定柱容量。

3． 液膜厚度。分析样品温度不一样，对膜厚有不同要求，温度高液膜要厚，温度低液膜要薄。

4． 柱长度。柱越长，柱效越高，分离效果越好，但也存在吸附问题，柱子过长，分析时间长，因此要根据样品考虑柱子长度。

5． 外涂层（柱体）的选择。

6． 另外还有仪器型号、分析对象等因素。

三、问：液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？

1． 筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。

2． 存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子。

四、问：从那些方面可以简单判别毛细管柱子的热稳定性好坏？

1． 分配容量（或容量因子）K，好的柱子在高温运行后，分配容量K不应有明显的下降，否则，说明柱子的热稳定性不好。

2． 理论塔板数n，热稳定性好的柱子经受高温后，理论塔板数应基本保持恒定。

3． 柱子的极性。热稳定性好的柱子，高温前后极性变化不大，具体表现为保留指数I值没有大的变化。

4． 噪声。热稳定性好的柱子在高温下使用后，噪声不能增加。

5． 柱子的去活层，毛细管柱子涂固定液前内部一般要用去活性试剂去活以增加惰性。质量好的毛细管柱子高温后，去活层不应该变化，表现在对强极性样品或酸碱性样品的吸附性不能增加。