液相色谱日常维护与故障排除

主要是：压力异常、漏 液、谱图问题、进样阀的问题。

一）压力异常

 操作压力的变化往往是故障的征兆。

A、没有压力显示，没有流动相流动：

      原 因                                  解决方法

1、电源问题                              接通电源，开机

2、保险丝被烧坏                          更换保险丝

3、控制器设定不正确或设定失败            采取恰当的设定、、修理或更换控制器

4、柱塞杆折断                            更换柱塞杆

5、泵头内有空气                          溶剂脱气、启动泵抽出空气

6、流动相不足                            补充流动相、更换入口滤头

7、单向阀损坏                            更换单向阀

8、漏液                                   拧紧或更换手紧接头

B、流动相流动正常，但没有压力显示：

           原 因                         解决方法

1、仪表损坏                              更换仪表

2、压力传感器损坏                        更换压力传感器

C、压力持续偏高

           原 因                            解决方法

1、流速设定过高                          调整流速设定

2、柱前筛板堵塞                          反冲色谱柱、更换筛板、更换色谱柱

3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀      使用恰当的流动相、冲洗柱塞杆。

4、色谱柱选择不当                        选择恰当的色谱柱

5、进样阀损坏                            清洗或更换进样阀

6、柱温过低                              提高温度

7、控制器失常                            修理或更换控制器

8、保护柱阻塞                            清洗或更换保护柱

9、在线过滤器阻塞                        清洗或更换在线过滤器

D、 压力持续偏低：

            原 因                             解决方法

1、流速设定过低                          调整流速

2、系统漏液                              确定漏液位置并维修

3、色谱柱选择不当                        选择恰当的色谱柱

4、柱温过高                              降低温度

5、控制器失常                            维修或更换控制器

E、 压力波动：

           原 因                              解决方法

1、泵中有气体                             溶剂脱气、从泵中除去气体

2、单向阀损坏                             更换单向阀

3、泵密封损坏                             更换泵密封

4、脱气不充分                             重新过滤一遍、溶剂脱气

5、系统漏液                               确定漏液位置并维修

6、使用梯度洗脱                           由于流动相粘度的变化引起的压力波动

二） 漏  液

     通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题，就必须将接头取下，检查是否损坏（例如，卡套损坏、密封表面有杂质）；损坏的接头应该更换掉。

A）接头处漏液

原 因 解决方法

1、接头松动 拧紧

2、接头磨损 更换

3、接头过紧 拧松，再重新拧紧、更换

4、接头被污染 拆下清洗、更换

5、部件不匹配 使用同一品牌的配件

B）泵漏液

原 因 解决方法

1、单向阀松动 拧紧单向阀（不必拧的过紧）、更换单向阀。

2、接头松动 拧紧接头（不必拧的过紧）

3、混合器密封损坏 更换混合器密封、更换混合器。

4、泵密封损坏 维修或更换泵密封件

5、压力传感器损坏 维修或更换压力传感器

6、脉冲阻尼器损坏 更换脉冲阻尼器

7、比例阀损坏 检查隔膜，如果漏液立即更换、检查手紧接头，损坏的立即更换

8、放空阀的损坏 拧紧放空阀、更换放空阀

C）进样阀漏液

原 因 解决方法

1、转子密封损坏 重新安装或更换进样阀

2、定量环阻塞 更换定量环

3、进样口密封松动 调整

4、进样针头尺寸不合适 使用恰当的进样针

5、废液管中产生虹吸 保持废液管高于废液液面

6、废液管阻塞 更换或疏通废液管

D）色谱柱漏液

原 因 解决方法

1、尾端接头松动 拧紧接头

2、卡套内有填料 拆下、清洗卡套、重新安装

3、筛板厚度不合适 使用合适的筛板

E）检测器漏液

原 因 解决方法

1、流通池垫片损坏 更换垫片、避免过大的背景压力（压力降）

2、流通池窗破碎 更换窗口

3、手紧接头漏液 拧紧或更换

4、废液管阻塞 更换废液管

5、流通池阻塞 重新安装或更换

三）谱图问题

液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。

A）峰拖尾

原 因 解决方法

1、筛板阻塞 反冲色谱柱、更换进口筛板、更换色谱柱

2、色谱柱塌陷 填充填料至色谱柱中

3、干扰峰 改变流动相或更换色谱柱

4、流动相PH选择错误 调整PH值，一般在3-7

5、样品与填料表面的溶化点发生反应 加入离子对或碱性修饰剂、更改色谱柱

6、柱外效应 调整系统连接（使用更短、内径更小的管路）使用小体积的流通池

7、二级保留效应，反相模式 加入三乙胺（碱性样品）、加入乙酸（或酸性样品）、加入盐缓冲剂（离子化样品）换柱

8、缓冲液不合适 使用浓度20-100mM的缓冲液、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液

B）峰前延

原 因 解决方法

1、柱温低 升高柱温，一般为25-40度，不得超过60度

2、样品溶剂选择不恰当 使用流动相作为样品溶剂

3、样品过载 降低样品含量

4、色谱柱损坏 更换新柱

C）峰分叉

原 因 解决方法

1、分析柱污染 可能是柱子污染，再生；入口可能被阻塞，拆下来清洗必要时更换色谱柱。

2、样品溶剂不溶于流动相 采取流动相作为样品溶剂。

D）峰变形

原 因 解决方法

1、样品过载 减少样品载量

2、样品溶剂选择不恰当 减少进样体积、运用低极性样品溶剂

E）额外的峰

原 因 解决方法

1、样品中有其他组份 正常

2、前一次进样的洗脱峰 增加运行时间或梯度斜率、提高流速

3、空位或鬼峰 检查流动相是否纯净、使用流动相作为样品溶剂、减少进样体积

F）保留时间波动

原 因 解决方法

1、温控不当 调好柱温

2、流动相组分变化 防止变化（蒸发、反应等）

3、色谱柱没有平衡 在运行前给予足够的时间平衡色谱柱

4、流速变化 重新设定流速

5、泵中有气泡 从泵中除去气泡

3、流动相选择不恰当 更换合适的流动相、选择合适的混合流动相

G）基线漂移

原 因 解决方法

1、柱温波动。 控制好柱子和流动相的温度

2、流动相不均匀或纯度不高 使用HPLC级的溶剂、高纯度的盐及添加剂、重蒸水、流动相在使用前进行脱气

3、流通池被污染或有气体 用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池

4、检测器出口阻塞 取出阻塞物或更换管子

5、流动相配比不当或流速变化 更改配比或流速

6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 更改流动相时，平衡半小时

7、流动相污染、变质 检查流动相的组成、重新配制

8、样品中有强保留的物质以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。 重新用水及甲醇清洗柱，除去强留份。

10、检测器没有设定在最大吸收波长处。 将波长调整至最大吸收波长处

H）基线噪音

原 因 解决方法

1、在流动相、检测器或泵中有空气 流动相脱气。强极性溶剂冲洗系统除去气。

2、漏液 检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。

3、流动相混合不完全 用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂

4、温度影响（柱温过高） 减少差异、稳定时间长一点

5、在同一条线上有其他电子设备 检查干扰是否来自于外部，加以更正。

6、泵振动 在系统中加入脉冲阻尼器

7、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 检查流动相的组成。

8、流动相各溶剂不相溶 选择互溶的流动相

9、检测器/记录仪电子元件的问题 断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。

10、流通池污染 清洗流通池

11、检测器灯能量不足 更换灯

12、色谱柱填料流失或阻塞 更换色谱柱

13、流动相混合不均匀或混合器工作不正常 维修或更换混合器

I）宽峰

原 因 解决方法

1、流动相组成变化 重新制备新的流动相

2、流动相流速太低 调节流速

3、漏液（特别是在柱子和检测器之间） 检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。

4、检测器设定不正确 调整设定

5、柱外效应影响：柱子过载；检测器对反应时间或池体积响应过大；柱与检测器间管路太长或管路内径太大 小体积进样、减少响应时间或使用更小的流通池、使用内径为0.007-0.01的短管路、减少响应时间

6、缓冲液浓度太低 增加浓度

7、色谱柱污染或失效，塔板数较低 更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以提供对称的色谱峰，则用强溶剂冲洗旧柱子。

8、柱入口塌陷 打开柱入口，填补塌陷或更换柱子

9、呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰 选择其它类型的色谱柱以改善分离效果

10、柱温过低 提高柱温。温度不宜超过60℃

12、检测器时间常数太大 使用较小的时间常数

J）所有的峰面积都太小

原 因 解决方法

1、检测器衰减设定过高或过低 减少或增加衰减的设定

2、检测器时间常数设定太大 设定较小的时间常数

3、进样量太少或太多 增大或减少进样量

4、记录仪连接不当 使用正确的连接

四）进样阀的问题

以下问题在使用进样阀过程中有可能发生。

A）手动进样阀，转动不灵

原 因 解决方法

1、转子密封损坏 更换或调整转子密封

2、转子太紧 调整转子的松紧度

B）手动进样阀，载样困难

原 因 解决方法

1、进样阀安装不当 重新安装

2、定量环阻塞 清洗或更换定量环

3、进样器污染 清洗或更换进样器

4、管路阻塞 清洗或更换管路