液相色谱高分辨质谱联用技术应用新进展

酰基肉碱是一类重要的代谢物，在许多生物过程中发挥重要作用，如脂肪酸的b-氧化代谢。由于不同长度的酰基链和同分异构体的存在，酰基肉碱的种类繁多。已有的大多分析方法中，可检测到的酰基肉碱数常常几十种。为了提高酰基肉碱的分析覆盖度，该课题组建立了一种能分析700余种酰基肉碱的液相色谱-质谱方法。

　　首先，在全扫描/数据依赖的二级质谱数据采集模式(Full MS/ddMS2)下分析混合生物样本，筛选出104个能产生酰基肉碱特征碎片的母离子。根据精确质量数和分子式，将上述酰基肉碱按元素组成进行大类归属。然后在各大类中计算每一个酰基肉碱理论质荷比，并用于在全扫描数据中的色谱峰提取，共发现298个酰基肉碱母离子，作为第二步靶向采集的基础。

      进一步地，在全扫描结合平行反应监测模式(Full MS +PRM)下, 在混合样本中对298个母离子进行靶向二级分析，得到其高分辨二级质谱信息，结合精确质量数、特征碎片、一级和二级色谱-质谱谱图确定酰基肉碱结构，共鉴定出733个酰基肉碱。

　　在上述基础上，在每个大类中根据结构-保留关系模型，进一步预测各同系物亚组中未检测到的酰基肉碱。最终，一个包含758种酰基肉碱的数据库被建立，该数据库是迄今为止最大的酰基肉碱数据库。应用建立的LC-MS方法和该数据库，可分别从人的血浆，尿液和小鼠的肝脏中检测出241, 515和222 种酰基肉碱。