使用Q Exactive Focus液相色谱质谱联用系统快速灵敏测定肉、血浆和牛奶中的多类兽药残留
Olaf Scheibner, Maciej Bromirski, Thermo Fisher Scientific, Bremen, Germany
关键词
Q Exactive Focus，Orbitrap，兽药，HRAM定量，HRAM筛查，vDIA，未知物筛查，回顾性数据分析
目的
本实验利用可变数据非依赖采集（vDIA），建立了一种兽药分析的新方法。该法具备高灵敏度和高选择性，能够获得被测样品全面而高质量的数据，并可将定量分析与非目标物和未知物筛查相结合。
引言
考虑到样品预处理和质谱分析的复杂性，动物源食品中的兽药残留分析通常是一个费时的过程。利用传统方法对动物源食品（包括肉、奶和血浆）中多类兽药残留进行定量分析，常常需要多次进样以获得各类成分的最佳分析条件，包括针对不同种类化合物而开发的不同色谱和质谱方法。并且所获数据仅仅包含目标化合物的信息，而不适用于其它化合物的回顾性分析。
本实验使用超快速液相色谱和Thermo ScientificTM Q Exactive FocusTM台式 OrbitrapTM质谱联用系统建立了一种新方法，其包含快速色谱方法和可变数据非依赖采集（vDIA）质谱方法。该法具有总分析时间短、选择性高和灵敏度高等优点，并且其采集的数据能够用于其它目标物和非目标物筛查。本实验利用vDIA方法制作标准曲线，并对样品中已知和未知目标化合物进行分析。vDIA允许设置多个MS/MS隔离窗口，窗口宽度可从50Da到800Da。通常较小的窗口宽度用于低质量区域以扩展动态范围和提高灵敏度，较大的窗口宽度用于更高质量区域以改善工作周期。该法的典型方法设置如本文所示，用5组MS/MS隔离窗口覆盖全扫描的整个质量数范围，同时保持MS/MS分析速度与快速色谱分离相匹配。
图1 Q Exactive Focus台式Orbitrap质谱仪
如表1所示，分析成分为44个不同种类的兽药残留，分析样品包括肌肉、肾脏、牛奶和血浆提取物，所有样品均采用相同的标准化色谱和质谱方法进行分析。为了进行绝对定量分析，44个浓度已知的兽残标准品被配制成8个不同浓度的标准品溶液（从100pg/mL （ppt）到500ng/mL （ppb））。采用高分辨、高质量精度的（HRAM）LC-MS/MS方法，分析基质加标样品（肌肉和肾脏中加入抗生素标样、牛奶中加入阿维菌素类标样、血浆中加入硝酸咪唑类标样）以评价方法。
表1 目标化合物及其定量限（LOQ）
