猪丹毒分子生物学诊断技术

  常规细菌培养检测猪丹毒至少要3天，鉴定血清型大约要lo天，而这种PCR法可在5h内完成。它使用两步扩增法，先用高度特异性引物组M0101-M0102进行初步扩增之后，再添加4种特异性寡核苷酸引物组对4种不同血清型猪丹毒的16SrRNA序列进行扩增。

    rRNA基因簇包括16SrRNA、23SrRNA、5SrRNA、下游非编码区。对该簇编码的DNA序列进行测定，以设计种特异性PCR检测系统的引物。猪红斑丹毒丝菌2型、3型、18型及扁桃体丹毒丝菌血清?型的rRNA基因的DNA序列的同源性在96．0％一98．4％。

    以前DNA探针杂交法和常规PCR都不能区分猪丹毒属这4种血清型，而这种PCR扩增法是特异的，能逐一区别鉴定，而且它可以从患病动物的组织样品中直接进行PCR试验并得出结果。整个试验不超过5h，这种对编码rRNA基因簇的DNA序列的特异性系统PCR扩增法十分，易读显示结果，可快速诊断屠宰场猪丹毒菌感染猪。