现代血液分析仪主要应用哪几种类别的检测原理

　　血细胞计数原理

　　血细胞计数的方法有：电阻抗脉冲法(简称电阻抗法)、光电计数法和激光计数法。经实践比较，电阻抗法简单实用，被普遍采用。这里我们只介绍电阻抗法血细胞计数的原理 [1] 。

　　电阻抗脉冲法血细胞计数原理

　　血细胞是电的不良导体，将血细胞置于电解液中，由于细胞很小，一般不会影响电解液的导通程度。但是，如果构成电路的某一小段电解液截面很小，其尺度可与细胞直径相比拟，那么当有细胞浮游到此时，将明显增大整段电解液的等效电阻。如果该电解液外接恒流源(不论负载阻值如何改变，均提供恒定不变的电流)则此时电解液中两极间的电压是增大的，产生的电压脉冲信号与血细胞的电阻率成正比。如果控制定量溶有血细胞的电解溶液，使其从小截面通过，即使血细胞顺序通过小截面，则可得到一连串脉冲，对这些脉冲计数，就可求得血细胞数量。由于各种血细胞直径不同，所以其电阻率也不同，所测得的脉冲幅度也不同，根据这一特点就可以对各种血细胞进行分类计数。这就是变阻脉冲法原理。由于电阻型血液细胞分析仪操作简便、快速、分析参数较多、价格便宜，已在国内普遍使用。

　　激光法血细胞计数原理

　　血液按一定比例稀释后形成一个极细的液流穿过激光束，每个血细胞被激光照射后产生光散射并被光电倍增管接收。细胞的前向角散射与细胞的体积大小有关、侧向角(或高角)散射与细胞的内部结构、颗粒性质等有关，细胞数量则与细胞通过激光束时光散射的脉冲次数相同。各种检测信号被放大、甄别后经计算机处理可得到各种血细胞的数量和体积大小的平均数、变异系数、占全血体积的百分比及体积大小分布直方图等.血红蛋白测定同电阻型仪器.白细胞可分为三类细胞。激光型比电阻型仪器稳定，不易受外电场的干扰，但激光管寿命有限。

　　血红蛋白测定原理

　　任何类型的血液分析仪均使被稀释的血液加入溶血剂红细胞溶解，释放的血红蛋白与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统，在特定波长下比色，吸光的变化与液体中血红蛋白含量成正比，仪器便可报告其浓度。不同系统血液分析仪配套溶血剂配方不同，形成的血红蛋白衍生物亦不同，吸收光谱各异，但迄今的血细胞分析仪选择使用的方法血红蛋白衍生物最大吸收均接近540nm。这是因为国际血液学标准委员会推荐的氰化高铁血红蛋白HiCN，最大吸收在540nm，校正仪器必须以HiCN值为标准。大多数系列血液分析仪溶血剂内均含有氰化钾，与血红蛋白作用后形成氰化血红蛋白。其特点是显色稳定，最大吸收接近540nm，但吸收光谱与HiCN有所不同，此点在仪器校正时应十分注意。为了减少溶血剂的毒性，避免含氰血红蛋白衍生物检测后的污物处理，近年来，有些血液分析仪使用非氧化血溶剂。实验证明，形成的衍生物与HiCNI吸收光谱相似，检测结果的精确性，准确性达到含有氰化物溶血剂同样水平，既保证了实验质量，又避免了试剂对分析人员的毒性和环境污染 [1] 。

　　综合型血液分析仪

　　此类仪器是多种先进的细胞分析技术的高度综合应用，对血细胞的分析参数更多，结果也更准确。如Coulter VCS血细胞分析仪就采用了体积分析、高频传导和激光散射等多项技术，Technicon H*3血细胞分析仪则采用了激光流式细胞分析、细胞化学染色、细胞分光光度术等多项技术。Technicon H*3的分析参数可达四十余项，对红细胞除可作一般分析外尚可对单个细胞内血红蛋白含量、浓度、细胞大小不等、高低色素性变化做出定量描述，而且可测定网织红细胞的数量、形态、体积、血红蛋白含量及浓度等.对白细胞可分出三类5种并提示幼稚细胞数量，还可对核象左移、核象右移、过氧化物酶染色强度作定量描述，而且还能分析淋巴细胞亚群等。

　　此类综合型仪器的性能代表了当今血液细胞分析仪的最新发展趋势，但价格昂贯，在临床常规血液学检查方面尚难普及。