用分离的亚细胞组分进行激酶分析

细胞器样品

激酶分析缓冲液ATP

SDS-PAGE 凝胶

1. 准备反应混合物：反应体积通常是 50~100 ml。

5X 激酶分析缓冲液                              10 μl

[γ-³²P] ATP（终浓度 5 μCi/5μmol/L)      5 μl

水                                                       0~35 μl

细胞器样品（相当于 1 mg 蛋白质）      1~35 μl

2. 加入激酶，开始反应。

3. 加入 10 ml 冰冷的 5X SDS-PAGE 加样缓冲液终止反应。

4. 混匀，于沸水浴煮 3 分钟。

5. 加样至 SDS-PAGE 凝胶。