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用分离的亚细胞组分进行激酶分析

实验材料细胞器样品试剂、试剂盒激酶分析缓冲液ATP仪器、耗材SDS-PAGE 凝胶实验步骤1. 准备反应混合物:反应体积通常是 50~100 ml。5X 激酶分析缓冲液 10 μl[γ-32P] ATP(终浓度 5 μCi/5μmol/L) 5 μl水 &......阅读全文

1100学者齐聚杭州 第二届质谱大会开幕

  分析测试百科网讯 2015年10月17日,第二届全国质谱分析学术报告会(质谱大会)在浙江大学紫荆港校区体育馆盛大开幕,本次大会由中国化学会、国家自然科学基金委员会主办,中国化学会质谱分析专业委员会、浙江大学化学系承办。浙江大学副校长罗建红教授、南京大学陈洪渊院士、中

人晶状体上皮细胞培育的增殖及永生化

实验概要人晶状体上皮细胞原代的和永生化细胞培养是为了一个能够调查研究人类晶状体上皮生理及白内障的模型系统而建立的。人晶状体上皮细胞培养是靠分离来自进行早产儿视网膜病变治疗的婴儿晶状体上皮碎片,并且允许上皮细胞从外植体生长。通过使细胞培养感染腺病毒(Adl2-SV40)来达到细胞永生化。实验步骤1.

透化细胞和退化细胞器中蛋白质的磷酸化实验

试剂的制备 单层培养细胞的透化 悬浮培养细胞的透化 用分离的亚细胞组分分析蛋白质的磷酸化 用分离的亚细胞组分进行激酶分析     &nbs

透化细胞和退化细胞器中蛋白质的磷酸化实验

试剂的制备单层培养细胞的透化悬浮培养细胞的透化用分离的亚细胞组分分析蛋白质的磷酸化用分离的亚细胞组分进行激酶分析试剂、试剂盒胞外缓冲液                        

蛋白质组学在植物科学研究中的应用

1 植物群体遗传蛋白质组学 1.l 遗传多样性蛋白质研究基于基因组学的一些遗传标记,如RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、SSR(Simple Sequen

渗透细胞蛋白磷酸化实验

基本方案 带分析 备择方案1 制备用于SDS-PAGE的天然细胞样品 备择方案2 制备用于等电聚焦的天然细胞样品            

CRISPR/Cas9应用近期重大进展

  基因组编辑技术CRISPR/Cas9被《科学》杂志列为2013年年度十大科技进展之一,受到人们的高度重视。CRISPR是规律间隔性成簇短回文重复序列的简称,Cas是CRISPR相关蛋白的简称。CRISPR/Cas最初是在细菌体内发现的,是细菌用来识别和摧毁抗噬菌体和其他病原体入侵的防御系统。  

Nature报道一种新型电泳技术:液晶电泳

      摘要: 来自美国肯特州立大学(Kent State University)的研究人员发现了一种新型电泳技术:向列液晶(nematic liquid crystal)电泳技术,这一技术未来也许将为生命科学领域提供新颖的分离技术,这一研究成果

RNA-蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

            实验方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物(RNP,核糖核蛋白颗粒)的方法,无论是对于粗提物还是提纯后的样品,对分析 RNP 的结构域的结构都非

电泳技术在医学中的应用(二)

6. 高效毛细管电泳及高效毛细管电泳2质谱联用:高效毛细管电泳是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为推动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。利用毛细管代替平板凝胶,分离效率得以提高。高效毛细管电泳的应用范围从小分子、无机离子到生物大分子,甚至整个细

RNA-蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

实验方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物(RNP,核糖核蛋白颗粒)的方法,无论是对于粗提物还是提纯后的样品,对分析 RNP 的结构域的结构都非常有效。实验材料 蛋白酶 KAMV 反转录酶试剂、试剂盒 缓冲液DNase ⅠDNase Ⅰ 缓冲液酚氯仿溶液乙酸钠R

RNA-蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物(RNP,核糖核蛋白颗粒)的方法,无论是对于粗提物还是提纯后的样品,对分析 RNP 的结构域的结构都非常有效。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合

梳理疾病生物标志物最新进展

  个体化医疗正越来越受到临床医学界的重视,而生物标志物是实施个体化医疗的基础。生物标志物(Biomarker)是近年来随着免疫学、分子生物学和基因组学技术的发展而提出的一类与细胞生长、增殖、疾病发生等有关的标志物;能反映正常生理过程或病理过程或对治疗干预的药物反应,在早期诊断、疾病预防、药物靶点确

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验             实验步骤

2018中国质谱大会生命科学与医学集锦

  分析测试百科网讯 2018年11月24日-26日,2018年中国质谱学术大会在广州东方宾馆盛大召开。本次大会包括一个报告主论坛,21个主题分论坛,共300余场演讲报告。在“生命科学与医学”分论坛上,数十位业内专家学者带来精彩的演讲报告,吸引参会人员驻足聆听。分析测试百科网作为本次活动的合作媒体,

蛋白质组学研究中的核心技术—双向凝胶电泳

许华林 张曼人类基因组计划与美国塞莱拉遗传信息公司于 2001 年在美国《科学》杂志和英国《自然》杂志联合宣布,他们绘制出了准确、清晰、完整的人类基因组图谱,至此,人类基因组计划已基本完成,随着后基因组时代的到来,蛋白质组学得到了空前的发展,蛋白质组研究旨在揭示基因表达的真正执行生命活动的全部蛋白质

蛋白质组学研究中的核心技术—双向凝胶电泳

人类基因组计划与美国塞莱拉遗传信息公司于 2001 年在美国《科学》杂志和英国《自然》杂志联合宣布,他们绘制出了准确、清晰、完整的人类基因组图谱,至此,人类基因组计划已基本完成,随着后基因组时代的到来,蛋白质组学得到了空前的发展,蛋白质组研究旨在揭示基因表达的真正执行生命活动的全部蛋白质的

蛋白质组学研究中的核心技术—双向凝胶电泳

人类基因组计划与美国塞莱拉遗传信息公司于 2001 年在美国《科学》杂志和英国《自然》杂志联合宣布,他们绘制出了准确、清晰、完整的人类基因组图谱,至此,人类基因组计划已基本完成,随着后基因组时代的到来,蛋白质组学得到了空前的发展,蛋白质组研究旨在揭示基因表达的真正执行生命活动的全部蛋白质的表达规律和

cDNA 文库的构建

            实验材料 λ噬菌体臂 大肠杆菌菌株 用于λ噬菌体的包装抽提物 试剂、试剂

外无细胞体系翻译病毒 mRNA

            实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶 肌

外无细胞体系翻译病毒 mRNA

实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶肌酸磷酸激酶 核酸酶 tRNAHeLaS3 细胞 TgSVA 细胞 Lx 细胞来源于表达人脊髓灰质炎病毒受体的 Ltk 细胞 NS20Y 细胞 人肝癌来源的 HepG2 细胞试剂、试剂盒 HEPES-KOH Tris-HCl 等渗

蛋白纯化经验指南-1

蛋白纯化经验指南生物谷整理 http://www.bioon.com  原创:Chromatography weixingui@263.net, 推荐书籍:《蛋白纯化与实验鉴定指南》、《生物工程下游技术》、《酶工程》、《酶制剂工业》 1) 我现在手头

2019中国生命科学领域CNS盘点:曹雪涛 颜宁 施一公上榜

  截至2019年12月23日,中国学者在Cell,Nature及Science在线发表了107篇文章(2019年的Cell ,Nature 及Science 已经全部更新),iNature团队对于这些文章做了系统的总结:  按杂志来划分:Cell 发表了31篇,Nature 发表了44篇,Scie

4.6 外无细胞体系翻译病毒 mRNA

用哺乳动物细胞 S10 抽提物翻译脊髓灰质炎病毒和丙型肝炎病毒 mRNA 的技术。实验材料ATPGTP质粒 DNA肌酸磷酸激酶10%SDS 胶肌酸磷酸激酶核酸酶tRNAHeLaS3 细胞TgSVA 细胞Lx 细胞来源于表达人脊髓灰质炎病毒受体的 Ltk 细胞NS20Y 细胞人肝癌来源的 HepG2

聚焦生命科学 2016北京色谱年会带你看热点

  分析测试百科网讯 2016年12月2日 为促进北京地区色谱技术的应用与交流,了解色谱技术的发展趋势,北京色谱学会于北京日坛宾馆举办了“2016年北京色谱年会”。本届色谱年会的主题是“色谱与健康”,年会邀请到张玉奎院士、江桂斌院士、庞国芳院士等色谱领域著名的专家、学者及色谱厂商作大会报告,报告在生

11月Science精华 我国科学家揭示非洲猪瘟病毒组装机制

  本周又有一期新的Science期刊(2019年11月1日)发布,它有哪些精彩研究呢?让小编一一道来。图片来自Science期刊。  1.我国科学家在Science期刊上解析出非洲猪瘟病毒的高分辨率三维结构并揭示它的组装机制  doi:10.1126/science.aaz1439  非洲猪瘟(A

电泳技术及其临床应用新进展

电泳技术是一门古老而又年轻的技术。早在1809年俄国物理学家Reuss就进行了世界上第一次电泳实验,此后各种电泳技术及仪器相继问世,广泛应用于蛋白质、氨基酸、核酸、其他有机化合物甚至无机离子等领域的分离和/或鉴定。近年来,先进的电泳技术和各种自动电泳分析系统被越来越多的临床实验室所采用检验|地带网搜

EMSA实验问题与解答

以下问题是以Promega公司试剂盒为例。凝胶迁移实验1)什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验?凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互

大规模蛋白质相互作用研究方法进展(三)

           图1 TAP亲和层析纯化原理[14]  注:A:标签中的ProteinA 与固化的IgG 结合缓冲液淋洗去除不能结合的杂蛋白,TEV 酶切分离ProteinA &nbs

大跃进 | 中国学者CNS发表超过100篇生命科学领域研究成果

  【50】2019年4月12日,中科院上海药物所徐华强,王明伟,浙江大学张岩及匹兹堡大学医学院Jean-Pierre Vilardaga共同通讯在Science发表题为“Structure and dynamics of the active human parathyroid hormone r