用Iodixanol分离人血液单核细胞

所需仪器：XL03RH型控温离心机（低速冷冻离心机，可使用24*15ml离心管，水平转子）

1）   将30ml血液加到含有Na₂EDTA的抗凝管里（终浓度5.5mmol/L）

2）   制备1.084g/cm³和1.065g/cm³ Iodixanol溶液

方法如下：

Iodixanol：60% Iodixanol溶液（Optiprep）

稀释介质：RPMI 1640 + 10%胎牛血清。

1.084g/cm³溶液：1.5ml 60% Optiprep + 4.5ml稀释介质

1.065g/cm³ 溶液：3ml 60% Optiprep + 13.4ml稀释介质

3）   全血在570g离心15分钟，弃去上层血浆，取出淡黄色层并与0.4体积的Optiprep混合。

4）   把富含白细胞的血浆/ Optiprep混合物转移到离心管，上面按顺序加入2ml 1.084g/cm³溶液、4ml 1.065g/cm³ 溶液和0.5ml稀释介质。

5）   用甩开吊篮转子700g离心15分钟。

6）   降速过程中不制动，收集分界面处的细胞，并且稀释介质稀释。

7）   在400g离心6分钟，把细胞悬浮于适当介质里备用。

湖南湘立研制生产的几款医用离心机可以用来进行细胞分离，如DL5M/TDL5M两种型号的低速冷冻离心机可用来进行干细胞实验。XL03RH型控温离心机（低速冷冻离心机）可用来进行温度敏感型人体细胞分离。