石磊：恒温PCR技术在食品安全检测领域的应用

　　2014年7月31日，第二届国际检验检测技术与装备博览会在北京国家会议中心隆重召开（以下简称检博会）。本届博览会以“高端技术，服务民生”为主题，以“质检、科技、国际”为特色，秉着“搭建国际平台，服务检测市场”的宗旨，为科技服务水平提升、检验检测行业和谐发展、科技成果交流与合作、检验检测仪器拓展市场提供一个国际平台。

　　在31日下午开展的食品检测专题技术交流会上，国家“千人计划”特聘专家、广州迪澳生物科技公司首席技术官石磊教授为大家带来《恒温PCR技术在食品安全检测领域的应用》的专题报告。

国家“千人计划”特聘专家、广州迪澳生物科技公司首席技术官石磊教授

　　进入21世纪以来，感染性疾病仍然是危害人类健康的重大隐患，新发病原问题突出，包括SARS、禽流感、猪链球菌感染人类和牛炭疽感染人类事件，这就对病原的检测盒诊断提出了更高的要求。

　　根据柯赫氏法则假设，表型或基因应与病原体相关联、基因的特殊失活会损失毒性、逆转或等位基因替代突变基因有助于恢复其致病性、基因产物可以诱导并中和抗体。

　　石磊教授向大家介绍了致病微生物检测现状——食品中沙门氏菌检测的国家标准，并指出常规的病原检测技术存在一定局限性，病原培养分离方法存在费时费力无法满足高效快速要求、培养困难或无法培养大部分病毒没有可靠培养手段、经验依赖高等不足。在另一方面目前主流PCR设备局限于高端市场、普及推广困难，基层医疗和检测机构需求得不到满足，传统PCR方法具有设备昂贵、基础设施投入大、专业人员要求高和操作复杂等缺陷。

　　石磊教授提出了病原快速检测的技术革新——通过恒温PCR进行分子检测。创新核心技术即简易高效的核酸扩增新技术，设备简便、快速准确，通过新型恒温扩增分子检测平台，将反应全过程恒定63℃，操作简单易于推广是分子检测技术的又一次革命。

　　分子检测方法优势

　　1.检测时间短、效率高：最快1h内出结果；

　　2.结果准确：特异的检测目标，结果判读客观；

　　3.适用面广：无法培养的病原只能用分子方法检测；

　　石磊教授在报告中指出恒温PCR与传统PCR相比，恒温扩增——无需热循环、持续扩增；酶——Bst DNA聚合酶高效扩增；引物设计——自我配对、自主扩增；反应底物浓度高——提高低拷贝模板的扩增概率。同时介绍迪澳恒温分子检测法——引物设计，通过特殊的引物设计可以保障检测特异性；介绍了其核心技术原理、高活性聚合酶（高活性-链置换DNA聚合酶、63℃的DNA复性和延伸）。

　　石磊教授还指出了恒温扩增法应用存在一定障碍，结果判读操作复杂、结果记录不方便、需要对产物进行后分析污染风险大。

　　最后介绍了迪澳技术平台，国内首创的恒温荧光检测仪和恒温荧光检测试剂盒，恒温PCR为PCR技术推广应用创造了全新的空间，可用于动物源性食品检测、转基因农产品检测、畜禽水产病害检测等。