确定光度计线性范围的下限和上限的方法

以下是确定光度计线性范围下限和上限的方法：

一、确定线性范围下限

1. 制备低浓度系列标准溶液：

• 选择一种合适的标准物质，制备一系列浓度逐渐降低的标准溶液。浓度范围应涵盖预期线性范围的低浓度端及更低浓度区域。

• 例如，使用已知浓度的某种有色化合物溶液，通过逐步稀释得到低浓度标准溶液。

2. 测量吸光度：

• 使用光度计测量每个低浓度标准溶液的吸光度。确保测量条件（如波长、比色皿等）保持一致。

• 记录每个标准溶液的浓度和对应的吸光度值。

3. 数据分析：

• 绘制吸光度与浓度的关系曲线，找到曲线开始明显偏离线性的点，该点对应的浓度可作为线性范围的下限近似值。

• 计算不同浓度下吸光度的相对标准偏差（RSD）。当 RSD 显著增大时，对应的浓度也可作为下限的参考。例如，当 RSD 超过一定百分比（如 5%或 10%）时，认为该浓度接近下限。

• 观察吸光度随浓度变化的趋势。当浓度继续降低时，吸光度的变化逐渐不明显，且测量的重复性变差。

• 通常可以通过以下方法确定下限：

二、确定线性范围上限

1. 制备高浓度系列标准溶液：

• 同样选择标准物质，制备一系列浓度逐渐升高的标准溶液，涵盖预期线性范围的高浓度端及更高浓度区域。

2. 测量吸光度：

• 用光度计测量高浓度标准溶液的吸光度。

3. 数据分析：

• 绘制吸光度与浓度的关系曲线，找到曲线明显偏离线性的点，该点对应的浓度可作为线性范围的上限近似值。

• 当吸光度值接近光度计的测量上限（如吸光度值接近 2 或 3，具体取决于光度计的性能），或者吸光度的变化率明显减小（如相邻浓度的吸光度变化小于一定比例）时，对应的浓度可作为上限的参考。

• 观察吸光度随浓度变化的趋势。当浓度继续升高时，吸光度可能不再随浓度成比例增加，出现饱和现象或者偏离线性关系。

• 确定上限的方法有：

此外，还可以考虑以下因素来更准确地确定线性范围的上下限：

• 参考光度计的技术规格和说明书，了解其标称的线性范围，但实际应用中可能会与标称值有所差异。

• 进行多次重复测量，以提高确定上下限的准确性和可靠性。

• 结合实际测量需求和样品的浓度范围，综合判断确定的线性范围是否满足应用要求。