前言
近年分子生物学、细胞生物学和生物化学等的发展使人们不断认识到糖类物质除储能之外还有其它诸多生物学功能,同时大量的实验结果也揭示了糖类物质是重要的信息分子,参与许多生理和病理过程。其中寡糖由于单糖分子、寡糖素结合位置和结合类型的不同,使得种类繁多,功能各异,寡糖的结构与组成直接决定了其生物学功能,鉴于糖缀合物上寡糖链在生命过程中的重要作用,展开寡糖链的结构分析是非常重要的。糖类的分析方法常规的有苯酚硫酸法、二硝基水杨酸法等化学方法,随着现在分析技术的进步,几种先进的物理学方法己经应用到寡糖的分析上来,如气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)和毛细管电泳法(CE)。这些方法分离能力高,方法灵敏快速。此外红外(IR)、核磁共振(1H-NMR,13C-NMR,COSY等)、质谱(MS)等方法也运用到了糖类结构分析中,使糖的分析方法有了质的飞跃。质谱是目前寡糖序列分析的常用方法之一。由于其灵敏度高,药品用量少,在糖分析中得以广泛应用。质谱不仅可用于提供寡糖的分子量信息,而且可以确定单糖残基间的连接顺序。近年来,快原子轰击质谱(FAB-MS)、电喷雾电离质谱(ESI-MS),基质辅助基光解吸质谱(MALDI-MS)在测定糖的分子量和糖链的一级结构方面得到广泛的应用。 本文中LTQ二维线性离子阱质谱仪在高质量端(m/z200-4000)具有很高的全扫描灵敏度,可以满足寡糖类样品对宽质量范围的需求。由于仪器正常使用的质量范围是50-2000(m/z),故对200-4000(m/z)质量段需要进行附加的校正。
实验条件
2.1 试剂和样品
PPG2700校正标样购于Sigma公司
寡糖类混合物 客户提供标准品
寡糖类混合物衍生物 客户提供
甲醇( 色谱纯, 德国Merck)
乙腈( 色谱纯, 德国Merck)
0.1%乙酸(优级纯,Merck)
2.2 质谱条件
Syringe Pump Flow Rate:5ul/Min
Spray Voltage: 4300 V
Sheath Gas: 5 Arb
Aux Gas: 0 Arb
Capillary Temperature: 270℃
Capillary Voltage:20 V
Tube Lens:200 V
对于高质量校正,以下参数需要特别设定
Sheath Gas: 30 Arb
Capillary Temperature: 350℃
Source Fragment: 20V
Tube Lens: 200V
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