离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液在高速旋转下,由于强大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(细胞器、生物大分子的沉淀等)加快沉淀速度,从而与溶液得以分离,而沉降速度取决于颗粒的质量、大小和密度。
基本原理:
当一个粒子(生物大分子或细胞器)在高速旋转下受到离心力作用时,此离心力“F”由下式定义,即:
F = m&S226;a = m&S226;ω2 r
a — 粒子旋转的加速度, m — 沉降粒子的有效质量,ω—粒子旋转的角速度, r—粒子的旋转半径( cm )。
通常离心力常用地球引力的倍数来表示,因而称为相对离心力 “ RCF ”。或者用数字乘“g”来表示,例如25000×g,则表示相对离心力为25000。相对离心力是指在离心场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g”
(980cm/sec2),此时“RCF”相对离心力可用下式计算:
RCF = 1.1∴19×10-5×(rpm)2 r
( rpm — revolutions per minute每分钟转数,r/min )
由上式可见,只要给出旋转半径r,则RCF和rpm之间可以相互换算。但是由于转头的形状及结构的差异,使每台离心机的离心管,从管口至管底的各点与旋转轴之间的距离是不一样的,所以在计算是规定旋转半径均用平均半径“ra v”代替:
ra v=( r min+rmax) / 2
一般情况下,低速离心时常以转速“rpm”来表示,高速离心时则以“g” 表示。计算颗粒的相对离心力时,应注意离心管与旋转轴中心的距离“r”不同,即沉降颗粒在离心管中所处位置不同,则所受离心力也不同。因此在报告超离心条件时,通常总是用地心引力的倍数“×g”代替每分钟转数“rpm”
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