红细胞比容的测定

实验概要

学习和掌握测定红细胞比容的方法。

实验原理

将定量的抗凝血灌注于特制的毛细玻璃管中，定时、定速离心后,有形成分和血浆分离，上层呈淡黄色的液体是血浆，中间很薄一层为灰白色，即白细胞和血小板（或栓细胞），下层为暗红色的红细胞，彼此压紧而不改变细胞的正常形态。根据红细胞柱及全血高度，可计算出红细胞在全血中的容积比值，即为红细胞比容（压积）。

主要试剂

草酸盐抗凝剂(0.8 g草酸钾•H2O   1.2 g草酸銨•H2O   甲醛1 ml   蒸馏水至100 ml)或10 g•L-1肝素，橡皮泥或半融化状态石蜡，75%酒精。 

主要设备

温氏分血管,普通离心机，注射器，长针头，干棉球。

实验材料

鸡

实验步骤

1. 温氏分血管比容法 

　　（1）取大试管和温氏分血管各一支，用抗凝剂处理后烘干备用。 
 

　　（2）取血：可采取静脉取血或心脏取血，将血液沿大试管壁缓慢放入管内，用涂有凡仕林的大拇指堵住试管口，缓慢颠倒试管2～3次，让血液与抗凝剂充分混匀，并不能使血细胞破碎，制成抗凝血。 用带有长注针头的注射器，取抗凝血2 ml将其插入分血管的底部，缓慢放入，边放边抽出注射针头，使血液精确到10 cm刻度处。 
 

　　（3）离心：将分血管以3000 r•min-1离心30 min，取出分血管，读取红细胞柱的高度，再以同样的转速离心5 min，再读取红细胞柱的高度，如果记录相同，该读数的1/10即为红细胞比容。 

注意事项

1.选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、溶解。草酸钾使红细胞皱缩，而草酸銨使红细胞膨胀，二者配合使用可互相缓解。鱼类多用肝素抗凝。 

　　
2.血液与抗凝剂混合、注血时应避免动作剧烈引起红细胞破裂。 

　　
3.用抗凝剂湿润的毛细玻璃管（或温氏分血管）内壁后要充分干燥。血液进入毛细管内的刻度读数要精确，血柱中不得有气泡。