细胞培养基配制

　　1. 干粉培养基原倍液的配制

　　1）配制过滤除菌的细胞培养基

　　(1) 阅读培养基使用说明，确定需要添加何种添加剂（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等）。

　　(2) 根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体积的95％，轻微搅拌溶解。

　　(3) 加入规定量的碳酸氢钠及所要添加的物质。

　　(4) 轻微搅拌溶解，加注射用水至规定体积。

　　(5) 用1 mol / L 氢氧化钠溶液或 1 mol / L 盐酸溶液调pH至所需值。

　　(6) 用0.22 μm滤膜正压过滤除菌。

　　(7) 溶液应在2℃－8℃下避光保存。

　　具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。

　　2）配制可高压灭菌细胞培养基

　　(1) 根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体积的95％，轻微搅拌溶解。

　　(2) 在121℃、15psi下灭菌15分钟。

　　(3) 待溶液冷却至室温，加入无菌0.2 mol / L L－谷氨酰胺溶液规定体积、无菌7.5％（w/v）碳酸氢钠溶液规定体积，加注射用水（20℃～30℃）至规定体积，混匀。

　　(4) 如果必要，用1 mol / L 氢氧化钠溶液或 1 mol / L 盐酸溶液调pH至所需值。

　　(5) 溶液应在2℃－8℃下避光保存。

　　具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。