结核杆菌的检测

结核杆菌与麻风杆菌是分枝杆菌属中的主要病原菌。

结核杆菌菌体细长略带弯曲，有分枝生长趋势。

菌体含脂量高，与其抗酸特性、抵抗力特性、致病性与免疫  性等都有密切关系。

该菌营养要求高，生长缓慢，形成“菜花状”菌落。

一、结核杆菌检验程序

结核病人病灶中查到结核杆菌，是病原学诊断的重要依据，根据感染部位不同，可采集病人的痰、尿、粪便、脑脊液、胸腹水、胃液等，按以下程序进行检验。

二、结核杆菌培养特性

1. 液体培养基（苏通氏培养基、小川培养基、血清酸性培养基等）结核杆菌生长表现：标本材料经前处理（即酸碱处理，可液化标本，也可杀死杂菌，还可浓缩集菌）后接种液体培养基，35℃培养1-2周，由于表面生物，可在培养基表面表成污灰、干燥、有皱褶的菌膜。

2. 固体培养基（改良罗氏培养基、丙酮酸钠培养基等）结核杆菌生长表现：标本材料经前处理后，接种固体培养基，37℃培养2-4周，在培养基表面可形成乳白或米黄色、不透明、粗糙颗粒状或节状堆聚的菌落，呈现“菜花状”。

3. 结核杆菌快速培养检测方法：无菌手续将前处理后的材料涂片，置液体培养基中，35℃恒温箱CO2培养箱内培养，3-5日后，每隔日取出一玻片，染色镜检，可快速获得结果。

三、齐一尼（Ziehl-Neelsen）抗酸染色法（操作）

【原理】

结核杆菌对苯胺染料不易着色，若加温或延长染色时间使其着色后，再用3%盐酸酒精处理也不易脱色，再经美兰复染，结核杆菌及其他分枝杆菌仍呈红色，而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。

【材料】

1. 结核病人痰液：采取清晨第一口粘痰，或浓缩集落菌法处理过的痰标本。

2．抗酸染色液

3. 载物玻片、玻片夹、酒精灯、腊笔等。