缩醛磷脂的分离纯化和鉴定

摘要　目的　研究从猪心中提取和纯化缩醛磷脂,并测定其纯度,以利于进一步研究其生物学作用。方法　取新鲜猪心切块,绞碎,制成匀浆后,再经一系列过程包括①总脂的提取; ②通过硅酸柱层析和硅胶薄板层析从总脂提取物中分离出磷脂酰乙醇胺(PE) 、磷脂酰胆碱(PC) 、磷脂酰肌醇( PI) 、磷脂酰丝氨酸( PS) 和鞘磷脂(SM) ,并从含PE 浓度最高的柱层析液中分离出PE; ③碱水解制备缩醛磷脂酰乙醇胺(plas2PE) ; ④通过硅酸柱层析和硅胶薄板层析从碱水解物中进一步纯化和鉴定plas2PE; ⑤分别用Iodinedisappearance 法和Bartlett 法检测plas2PE 制剂中plas2PE 的含量及无机磷的含量,并计算出其纯度。结果　①从总脂提取液中分离出下列几种磷脂并经标准品鉴定出为PE、PI + PS、PC 和SM ,其Rf 值分别为0. 87 、0. 75 、0. 54 和0. 37 ; ②从含PE 浓度最高的柱层析液中分离出PE ,并经碱水解,制备出plas2 PE ,其在薄板层析板上的Rf 值为0. 81 ; ③plas2PE 制剂中无机磷含量为3. 161μmol/ml ,plas2PE 含量为3. 006μmol/ ml ,经计算plas2PE 的纯度为95. 10 %。结论　猪心是缩醛磷脂含量丰富的器官,采用硅酸柱层析及碱水解分离是制备缩醛磷脂的有效流程。