羊水细胞染色体制备方法（原位法）

细胞培养
1. 将羊水（约20ml）转移到无菌的离心管中，1000rpm离心10分钟；
2. 去除上清液，用于其它分析，保留细胞悬液约0.5~1ml，用培养基混匀到2~2.5ml左右；
3. 将细胞悬液平分到3只Chromslide培养皿中；
4. 培养24/48小时后，向每只Chromslide培养皿中加入约2.5ml羊水培养基；
5. 培养第5～6天后，对细胞生长状况进行观察，更换新的培养基；
6. 1～2天后观察细胞的生长状况，如果细胞克隆数足够，向培养皿中加入秋水仙素，收获细胞， 处理时间根据秋水溶液浓度确定。

染色体制备
1. 倾斜Chromslide细胞培养皿，完全去除培养基；
2. 加入3~4ml低渗液到每个培养皿中，室温处理10分钟；
3. 直接向低渗液中加入0.5~0.7ml固定液，室温处理5分钟；
4. 去除上清液，加入3~4ml新鲜的固定液，室温处理（处理时间不影响最终结果）；
5. 重复第四步1～2次；
6. 去除固定液，在Maxchrome染色体分散仪（设定适当的参数）中进行染色体分散过程；
7. 玻片干燥后，老化，显带。

注：
1. 羊水染色体制备过程中的染色体分散程度与Chromslide的性能没有任何关系，只与分散条件相关（Maxchrome分散仪的参数设定）。
2. 秋水溶液的浓度和处理时间，参考各实验室的常规处理方法。
3. 原位法需掌握好细胞生长密度，细胞太密不利于染色体分散。
4. 玻片老化时间，根据具体情况，灵活控制。
5. 如果羊水细胞贴壁不佳，在排除了其它可能因素后，可适当多留些羊水上清液，上清液中的一些蛋白有助于羊水细胞生长的贴壁。
6. 细胞培养过程中，防止振动对细胞贴壁的影响。