肌肉组织染色实验

实验方法原理

肌肉组织由肌细胞和肌纤维组成，带有横纹结构，通常选用 Mallory 磷钨酸-苏木精染色法（PTAH）显示横纹肌的变化情况。染色剂与所选择的组织成分能够牢固地结合，呈蓝色或棕红色。

实验材料 石蜡组织切片

试剂、试剂盒 苏木精磷钨酸蒸馏水 高锰酸钾水溶液硫酸水溶液二甲苯乙醇中性树胶

实验步骤

Mallory 磷钨酸-苏木精染色液：苏木精 0~1 g，磷钨酸 2 g，蒸馏水 100 ml。将苏木精置 20 ml 蒸馏水中加热溶解，再将磷钨酸溶于 80 ml 蒸馏水中。苏木精冷却后加入磷钨酸水溶液，混合后置室温数周至数月成熟，可久存。如急用，可再加入 0.177 g 高锰酸钾而促其成熟。

酸性高锰酸钾液：0.5％ 高锰酸钾水溶液 50 ml，0.5％ 硫酸水溶液 50 ml。

1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。

2. 自来水洗 1 min，蒸馏水洗 1 min。

3. 在酸性高锰酸钾液中氧化 5~10 min。

4. 自来水洗 1 min，蒸馏水洗 1 min

5. 用 1％ 草酸液漂白 2 min。

6. 自来水洗，蒸馏水洗 2 次。

7. 入 Mallory 磷钨酸-苏木精染色液中 12~48 h。

8. 直接用 95％ 乙醇分化 30 s。

9. 无水乙醇急速脱水，二甲苯透明和中性树胶封固。

注意事项

1. 磷钨酸-苏木精配制后在室温下自然成熟，可用多年，使用时不要摇动。

2. 95％ 乙醇快速分色时，注意切片上保持一定的红色，无水乙醇脱水后，迅速用滤纸吸干、透明和封固。

其他

结果：横纹肌呈紫蓝色，结缔组织纤维呈棕红色。