胡萝卜素、叶黄素和叶绿素在反相超临界色谱中分离初探

摘 要：在本项研究中，应用反相C18固定相超临界CO2色谱对胡萝卜素、叶黄素和叶绿素的分离进行了初步的探索。胡萝卜素、叶黄素和叶绿素的下述色谱条件下被完全分开：色谱柱：Zorbax ODS；流动相：3%(V/V)正丙醇及超临界CO2 流体；超临界条件：压力：4000psi；温度：40℃；流速：2.0ml/min；检测波长：435nm。与反相C18高压液相色谱结果相比，这些组分的超临界色谱呈正相洗脱行为。这一结果表明：超临界CO2流体具有很强的非极性，同时，也证明了预装的反相C18柱可以作为正相固定相来分离这些化合物．
关键词：胡萝卜素；叶黄素；叶绿素；超临界流体色谱

    在完整的生物合成系统中，不含氧的类胡萝卜素-胡萝卜素(Carotene)- 和含氧的类胡萝卜素- 叶黄素(Xanthophyll)- 通常是共存的。在光合组织中，类胡萝卜素(Carotenoid)又总是与叶绿素(Chlorophyll)共存[1]。在对光和组织中的类胡萝卜素进行分析与测定时，通常用有机溶剂将光合组织中的类胡萝卜素与叶绿素同时萃取出。因此，在分析光合组织萃取物( 尤其是绿色蔬菜食品) 中的类胡萝卜素时，将类胡萝卜素和叶绿素进行分离是必需的要求。对于非光合组织的样品，也需要分离胡萝卜素和叶黄素。
    达到上述分离目的最有效手段是色谱(Chromatography)。色谱可以被形容为一个物理化学过
程。这个过程可以被描述为被分离的不同组分在两相之间的分离。两相之中的一相在分离过程中处于静止的状态，被称为固定相，另一相则是不断运动的，被称为流动相。当一组混合物中的不同组分分布于流动相中达到平衡后，流经固定相时，混合物中的每一个组分在两相之间达到新的分布平衡，结果导致不同组分在系统中具有不同的迁移率(Mobility)，最终使不同组分在流动
相中被分离。组分在固定相中的迁移可以用“容量因子(Capacity factor，见表达式1)”来描述。当混合物被分离时，不同组分在色谱系统中有不同的容量因子。