分离获得ASC后,可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后,传代2〜3次,ASCs呈现单层,大而扁的细胞形态,其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时,它们形态上呈纺锤体形,类似于成纤维细胞。来源:《人干细胞培养》
实验材料 | |
---|---|
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | (a)细胞达到80%汇合时即可传代。 (b)弃去培养基,加人PBSA洗涤贴壁细胞。 (c)加入足量胰蛋白酶,使之覆盖细胞,将培养瓶中,置于37℃,5% CO2温箱中。 (d)细胞与胰蛋白酶共孵育3 min后,用细胞刮将细胞刮下。 (e)加人ASC培养基使胰蛋白酶失活。 (f)按照1:2比例,将细胞接种至2个T-25培养瓶中。 |