脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的传代培养

分离获得ASC后,可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后,传代2〜3次,ASCs呈现单层,大而扁的细胞形态,其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时,它们形态上呈纺锤体形,类似于成纤维细胞。来源:《人干细胞培养》实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基PBSA胰蛋白酶仪器、耗材组织培养瓶 25cm2(T-25)细胞刮实验步骤(a)细胞达到80%汇合时即可传代。(b)弃去培养基,加人PBSA洗涤贴壁细胞。(c)加入足量胰蛋白酶,使之覆盖细胞,将培养瓶中,置于37℃,5% CO2温箱中。(d)细胞与胰蛋白酶共孵育3 min后,用细胞刮将细胞刮下。(e)加人ASC培养基使胰蛋白酶失活。(f)按照1:2比例,将细胞接种至2个T-25培养瓶中。展......阅读全文

脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的传代培养

分离获得ASC后,可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后,传代2〜3次,ASCs呈现单层,大而扁的细胞形态,其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时,它们形态上呈纺锤体形,类似于成纤维细胞。来源:《人干细胞培养》实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基PBSA胰蛋白酶仪器、耗材组织培养瓶 25

脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的原代培养

实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基仪器、耗材组织培养瓶 25cm2实验步骤(a)待细胞贴壁生长2〜4天后换液。(b)换液时通过弃去培养基,从而去除未贴壁的细胞。(c)以后每周更换培养基2次。

脂肪干细胞培养和扩增实验

脂肪干细胞的原代培养 脂肪干细胞的传代培养             实验方法原理 实验材料 脂肪干细胞

脂肪干细胞培养和扩增实验

脂肪干细胞的原代培养脂肪干细胞的传代培养实验方法原理实验材料脂肪干细胞                                                          试剂、试剂盒ASC培养基                                            

简述脂肪干细胞和脂肪细胞的共培养

  将准备好的脂肪干细胞和脂肪细胞分别置于Transwell 的上室和下层中,脂肪干细胞与脂肪细胞的个数之比分别为1:5,1:1,2:1 和5:1(4 组分别命名为A、B、C 和D 组)进行共培养,其中每孔中脂肪细胞的数量均为1×105 个。以上每组均做平行实验(n=3)。

脂肪干细胞培养

吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL. 在1 h内将其移至离心管内,加入等量PBS缓冲液,充分振荡后低速离心800 r/min×10 min. 反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶. 37℃水浴中充分振荡30 min,再加入等量胎牛血清(FBS)中止. 低速离心10

脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验—脂肪干细胞脂肪分化

实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒脂肪诱导培养基脂肪细胞生长培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入脂肪诱导培养基,将培养瓶放回温箱。(d)三天后,将诱导培养基更换成脂肪细胞生长培养。注意事项其他培养基配方:成脂诱导培养基:DMEM/F12 1×、胎

脂肪源干细胞的培养

(1)吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL。(2) 在1 h内将其移至离心管内,加入等量PBS缓冲液,充分振荡后低速离心800 r/min×10 min。(3)反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶,37℃水浴中充分振荡30 min,再加入等量胎牛血清(FBS)中止。(4)低

脂肪干细胞实验细胞培养的介绍

  将吸脂来源的脂肪组织用D-Hanks 冲洗,去除残留的血细胞和组织碎片,把脂肪组织放入离心管中,记录原始体积。向组织中加入等体积的0.1%Ⅰ型胶原酶,放入37℃气浴振荡器中消化30 min。然后将消化好的组织静置5 min,待其分层后,用吸管吸取位于悬液上层的脂肪细胞,将含有脂肪细胞的悬液以10

关于脂肪干细胞的分离和培养介绍

  将脂肪组织冲净,称重后消化。当消化完成后,弃掉上层未消化的脂肪组织,将下层的细胞悬液以1500 r/min(375g),离心10 min 后弃上清,得到离心管底部的脂肪干细胞团,将其重悬,密度调整到1×105mL-1,然后接种在培养面积为25 cm2 的细胞培养瓶中。  当干细胞长满培养瓶后按一

脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验——脂肪干细胞软骨分化

实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒成软骨诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a) 吸去培养基(b) 加人PBSA润洗细胞。(c) 加人成软骨诱导培养基,将培养瓶放回温箱注意事项其他培养基配方:成软骨诱导培养基:DMEM(低糖)1×、丙酮酸钠110 mg/L、ITS+ 1%、抗坏血酸-2-磷酸盐0

脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验—脂肪干细胞神经分化

在培养过程中,ASCs 可在很长时间内保持未分化状态。ASCs 具有成纤维细胞样形态,胞内缺乏脂肪细胞中所见的脂滴。体外扩增后,ASCs 的表型会发生改变,主要体现在细胞表面蛋白和细胞因子表达的变化。ASCs 的表型与骨髓和骨骼肌来源的干细胞相似。免疫组化染色发现,诱导的 ASCs 可以表达神经细胞

脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验—脂肪干细胞骨分化

实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒成骨诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加人成骨诱导培养基,将培养瓶放回温箱。注意事项其他培养基配方:成骨诱导培养基:DMEM(高糖)1×、胎牛血清10%、β-甘油磷酸10 mmol/L、抗坏血酸-2-磷酸盐0.

MSCs培养物的扩增和冻存实验_间充质干细胞的传代培养

缩小细胞培养体积试验证明,MSCs最好培养于直径15cm的Nunclon或Corning板中,面积在140cm2和150cm2之间。细胞产率取决于培养皿的数量,一般使用此方法传代,每个培养皿中可收获5X105个细胞。来源:《人干细胞培养》实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌完全培养培养基(CCM)、PB

脂肪干细胞的简介

  脂肪组织在人体内储量丰富,通过抽脂从中获得的大量脂肪干细胞(ADSCs),有自我更新增殖及多向分化潜能,可向脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞、成骨细胞、神经细胞、神经胶质细胞及胰岛细胞分化,而且可分泌多种促血管生成因子和抗凋亡因子而抗炎、抗氧化,可抵抗氧自由基的损伤,有望成为修复受损的组织和器官的干细

关于脂肪干细胞共性培养的分析介绍

  为脂肪细胞与脂肪干细胞经过20d 共培养后脂肪干细胞的Hoechst/PI 死活染色结果。Hoechst 染料对活的细胞具有特异性染色的特点,PI 则对死细胞特异性染色。从中可以看到,两组中的细胞均呈明亮的蓝色,说明细胞的活性很好。基本上看不到PI 染成红色的死细胞的存在。表明,本实验中,经过共

脂肪干细胞培养_吸脂术法

实验材料深层脂肪组织试剂、试剂盒PBS缓冲液蒸馏水I型胶原酶氯化铵青霉素DMEM仪器、耗材离心管针管灭菌锅离心机水浴锅培养箱培养瓶流式细胞仪脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。研究发现ADSCs细胞

脂肪干细胞的作用机制

  脂肪干细胞来源于中胚层,现已证明其具有向骨、软疾病种类临床阶段骨、脂肪、肌腱、神经、内皮细胞、肝细胞和造血方向分化的潜能。例如,脂肪干细胞治疗心肌梗死的可能机制包括以下几个方面:①向心肌细胞、血管内皮细胞分化,直接修复坏死心肌细胞。脂肪干细胞能通过减少心脏重塑,增加血管生成来提高心肌梗死后心功能

关于脂肪干细胞的简介

  脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。主要恢复组织细胞的修复功能,促进细胞的再生,恢复年轻面容的同时,身体机能也得到充分改善,有效改善亚健康、早衰等疾病,由内而外真正的有效抵抗衰老。

脂肪来源干细胞的取材与分离实验

从小鼠腹股沟脂肪垫获取ASCs实验方法原理人和小鼠的脂肪组织均可用于分离ASC,可以获得相当数目的ASCs。人脂肪组织通常来源于抽脂。小鼠脂肪组织则取自腹股沟处脂肪垫。实验材料小鼠 4〜6只试剂、试剂盒Hank’s缓冲盐溶液(HBSS)ASC培养基胶原酶溶液聚乙烯吡咯酮碘溶液麻醉剂:三溴乙醇 37℃

脂肪来源干细胞的取材与分离实验

实验方法原理 人和小鼠的脂肪组织均可用于分离ASC,可以获得相当数目的ASCs。人脂肪组织通常来源于抽脂。小鼠脂肪组织则取自腹股沟处脂肪垫。实验材料 小鼠 4〜6只试剂、试剂盒 Hank’s缓冲盐溶液(HBSS)ASC培养基胶原酶溶液聚乙烯吡咯酮碘溶液麻醉剂:三溴乙醇 37℃水浴仪器、耗材 Petr

脂肪来源干细胞的取材与分离实验

从小鼠腹股沟脂肪垫获取ASCs实验方法原理人和小鼠的脂肪组织均可用于分离ASC,可以获得相当数目的ASCs。人脂肪组织通常来源于抽脂。小鼠脂肪组织则取自腹股沟处脂肪垫。实验材料小鼠 4〜6只试剂、试剂盒Hank’s缓冲盐溶液(HBSS) ASC培养基 胶原酶溶液 聚乙烯吡咯酮碘溶液 麻醉剂:三溴乙醇

ADSc提纯脂肪干细胞移植

ADSc提纯脂肪干细胞移植的出现“自体脂肪移技术”用于整形已经很多年时间,如今早已发展成自体脂肪干细胞移植,“自体脂肪干细胞移植术”已经是一项很常见的整形手术。但是该术式始终存在着成活率不足的问题,难以保障术后的效果,ADSc提纯脂肪干细胞移植的出现完全打破了这种局面。ADSc提纯脂肪干细胞移植的定

正常小鼠腹股沟脂肪垫获取脂肪源干细胞

PriCells: 正常小鼠腹股沟脂肪垫获取脂肪源干细胞实验材料:1. Hank’s缓冲盐溶液(HBSS);2. ASC培养基:含10%胎牛血清的DMEM,添加1%的P/S;3. 胶原酶溶液:100ml Hank’s缓冲盐溶液中加入1g牛血清白蛋白和0.1gⅡ型胶原酶;4. 聚乙烯吡咯酮碘溶液;5.

正常小鼠腹股沟脂肪垫获取脂肪源干细胞

正常小鼠腹股沟脂肪垫获取脂肪源干细胞实验材料:1.Hank&rsquo缓冲盐溶液(H);2.ASC培养基:含10%胎牛血清的DMEM,添加1%的P/S;3.胶原酶溶液:100ml Hank&rsquo缓冲盐溶液中加入1g牛血清白蛋白和0.1gⅡ型胶原酶;4.聚乙烯吡咯酮碘溶液;5.陪替氏培养皿,9c

脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验

脂肪干细胞的神经分化脂肪干细胞的脂肪分化脂肪干细胞的骨分化脂肪干细胞的软骨分化实验方法原理实验材料脂肪干细胞                                                                                      试剂、试剂盒神经诱导

脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验

脂肪干细胞的神经分化脂肪干细胞的脂肪分化脂肪干细胞的骨分化脂肪干细胞的软骨分化实验方法原理实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒神经诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入神经诱导培养基,将培养瓶放回温箱其他培养基配方:DMEM 1×、EtOH溶的丁

脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验

实验方法原理 实验材料 脂肪干细胞试剂、试剂盒 神经诱导培养基PBSA仪器、耗材 培养瓶实验步骤 (a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入神经诱导培养基,将培养瓶放回温箱其他 培养基配方:DMEM 1×、EtOH溶的丁基羟基苯乙醚36μg/ml(0.2 mol/L)、氯化钾5 m

简述脂肪干细胞的作用机制

  脂肪干细胞来源于中胚层,现已证明其具有向骨、软疾病种类临床阶段骨、脂肪、肌腱、神经、内皮细胞、肝细胞和造血方向分化的潜能。例如,脂肪干细胞治疗心肌梗死的可能机制包括以下几个方面:  ①向心肌细胞、血管内皮细胞分化,直接修复坏死心肌细胞。脂肪干细胞能通过减少心脏重塑,增加血管生成来提高心肌梗死后心

脂肪干细胞的主要特点

  脂肪干细胞特点:1、自体干细胞容易与自身细胞结合;2、有助于网状成纤维细胞的增殖;3、可按要求诱导组织的生长及自体干细胞的迁移。  研究发现ADSCs细胞能够在体外稳定增殖且衰亡率低,同时它具有取材容易、少量组织即可获取大量干细胞,适宜大规模培养,对机体损伤小等优点,而且其来源广泛,体内储备量大