色谱柱使用过程中的护柱方法及柱压升高原因

一、色谱柱使用过程中的护柱方法

1、最好用预柱。（但要注意，若有时出峰异常，要先看看是不是它有问题了）

2、每次做完分析，都要进行冲洗，

①分析用流动相中若无酸、碱、盐类物质，建议用90％甲醇冲洗30～60min；

②若分析用流动相中含以上物质，要先用10％甲醇（或用与分析用流动相同比例，把含酸、碱、盐溶液换成水）冲洗1小时左右，再C梯度走到90％甲醇冲洗30～60min（若用多元泵）。有必要时再循环几次，可以适当缩短时间。

③若长时间不用该色谱柱，要冲洗好后，用纯甲醇或乙腈封存。

3、若流动相中用到离子对试剂，更应该好好冲洗，且该色谱柱最好作为专用，不能再做其它物质分析用。因色谱柱填料性质已与原来所不同，在该柱上所摸索的色谱条件，可能在其它同类柱子上得不到重现。

4、尽量避免反冲，除非该色谱柱厂家明确说明允许。

5、普通气相毛细管色谱柱尽量避免在40℃以上的温度下分析。

6、定期测柱效，有下降，可以用10％异丙醇甲醇冲洗色谱柱。若柱效还没有改善，可以再生，甲醇－二氯甲烷－甲醇。

二、色谱柱在使用过程柱压升高的原因
 
    柱压与硅胶基质的形态（如无定形或球形硅胶）、颗粒大小、填料合成条件、装柱条件、所用流动相和分析时的温度有关。不同厂家的色谱柱柱压会有所差别，相同流动相和温度的条件下，不同厂家的新色谱柱有的柱压可能相差4、5 个MPa，特别是低端和高端色谱柱之间，这一区别比较明显。这是由色谱柱厂家所选用的硅胶基质及其生产条件决定的，这种差异的存在是正常的。同时需要说明的一点是，柱压与柱效有一定的关系，通常柱效高的色谱柱柱压相对而言会高一点，但柱压高的色谱柱并不一定就具有高柱效。

    在色谱柱的使用过程中柱压通常会出现两种升高的形式：第一种是，随着使用时间的延长色谱柱柱压慢慢上升，这是正常的；第二种是，使用过程中（流动相和温度没有改变的条件下）色谱柱压力突然升高很多。这种压力突然升高的现象，通常是由工作人员操作不当引起的，原因：
1）样品太脏，使用前没有过滤，导致柱筛板堵塞。
2）样品含有的杂质在流动相中的溶解性不是很好，与流动相混合后析出，导致柱塞板堵塞。