色谱柱的正确运用和保护养护:
色谱柱的正确运用和保护十分重要,稍有不小心就会下降柱效、缩短运用寿数乃至损坏。在色谱操作过程中,需求注意下列疑问,以保护色谱柱。
1、新的色谱柱前运用要活化
2、防止压力和温度的急剧改动及任何机械轰动。温度的俄然改动或许使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情况;柱压的俄然升高或下降也会激动柱内填料,因此在调理流速时大概缓慢进行,在阀进样时阀的转变不能过缓(如前所述)。
3、应逐步改动溶剂的组成,特别是反相色谱中,不该直接从有机溶剂改动为全部是水,反之亦然。
4、一般说来色谱柱不能反冲,只要生产者指明该柱能够反冲时,才能够反冲除掉留在柱头的杂质。不然反冲会敏捷下降柱效。
新色谱柱的活化:1、装置以乙腈(反相)或乙腈正己烷(1:99)正相冲刷整个系统。
2、查看流路体系有无气泡,气泡会形成色谱柱填料空隙而影响色谱柱的别离效能。
3 按色谱柱上标明方向,接上色谱柱,开始流速为0.1-0.2ml/min逐步大,1.0ml/min,所需试剂为10倍柱体积,暂停体系,更换流动相,开始流速为0.1-0.2,逐步增大,直到体系平衡。
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