荧光法检测种子实验

实验方法原理：植物种子中经常存在着许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质，如某些黄酮类、香豆、素类、酚类物质等，在种子衰老过程中，这些荧光物质的结构和成分往往发生变化，因而荧光的颜色也相应改变；有些种子在衰老死亡时，荧光物质的性质虽未改变，但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性增大，浸种时，种子中的荧光物质很容易外渗。前一种情况可以用直接观察种胚荧光的方法确定种子死活，后一种情况则可通过观察荧光物质渗出的多少来确定种子死活。

实验材料：

植物种子

仪器、耗材：

紫外线荧光灯                                                                  

不产生荧光的白纸                                                                  

刀片                                                                 

镊子                                                                 

培养皿                                                                

烧杯   

实验步骤：

1．直接观察法：此法适用于一些松株类、禾谷类及某些蔷薇果树种子，但种间差异较大。

用刀片沿胚的中心线将种子纵切成两半，取一半放在不产生荧光的白纸上，使种子的切面朝上，放在紫外线荧光灯下照射并进行观察，记载。有生活力的种子产生明亮的兰色、兰紫色、紫色或兰绿色的荧光，死种子多半是黄色、褐色以至暗淡无光，并带有多种斑点。

观察100粒种子，计算出活种子的百分率。

2．纸上荧光法：此法在十字花科种子中效果较好。

（1）将已吸涨的种子100粒，以3－5 M  M 间隔整齐地排列在培养皿中的双层潮湿滤纸上，滤纸上的水分以稍有余滴为度，以免水分过多时，荧光物质流失。

（2）放置1小时后，令其自然风干，于254n M 紫外分析仪照射下观察。死种子周围有明亮的兰色或兰紫色光圈。

（3）计算活种子的百分率。