薄层层析分离支持剂的选择与处理

   薄层层析分离支持剂的选择主要考虑两方面：一是支持剂的性质与适用范围；二是支持剂的颗粒大小。一般来说，所选吸附剂应具有zui大的比表面积和足够的吸附能力，对待分离的不同物质应有不同的吸附能力，即有足够的分辨力。所选吸附剂与溶剂及样品组分不会发生化学反应。吸附剂必要时用离心机进行预处理。

        吸附力的强弱规律如下：吸附力与两相间界面张力的降低成正比。某物质溶液中被吸附的程度与其在溶剂中的溶解度成反比。极性吸附剂易吸附极性物质，非极性吸附剂易吸附非极性物质。同族化合物的吸附程度有一定的变化方向。

一、支持剂的性质与适用范围：

  1、硅胶：

        硅胶是应用zui广泛的一种吸附剂，主要优点是化学惰性，具有较大的吸附量，易制备成不同类型、孔径和表面积的多孔性硅胶。硅胶的吸附活性取决于含水量，吸附层析一般采用含水量10%～12%的硅胶，含水量小于1%的活性zui高，含水量大于20%时活性zui低。

        硅胶适用于分离酸性和中性物质，碱性物质能与硅胶作用，如用中性溶剂展开，碱性物质有时留在原点不动或者斑点拖尾，而不能很好地分离。为了使某一类化合物得到满意的分离，可改变硅胶的酸碱性。

        使用硅胶和硅藻土时，通常要先加入粘合剂再在支持板上涂布。常用的粘合剂有煅石膏和淀粉。用煅石膏为粘合剂的薄层易从玻璃板上脱落，但可适用腐蚀性试剂。加淀粉制成的薄层，机械性能较好，但不宜用腐蚀性强的试剂。

  2、氧化铝：

        氧化铝是微碱性吸附剂，适用于亲脂性物质的分离制备，具有较高的吸附容量，价格低廉，分离效果好，应用较广泛。

        使用氧化铝作吸附时，要注意选择适当活性及适当酸碱度的产品。

  3、聚酰胺：

        可分离多种化合物，在蛋白质或肽的N末端残基分析中是比较理想的分离方法。

  4、硅藻土和纤维素：

        硅藻土和纤维素是中性支持剂，需在吸附水、缓冲溶液或甲酰胺等后才能用于薄层层析分离。

二、支持剂的颗粒大小：

        用作薄层层析分离支持剂的颗粒要求大小适当、均匀。颗粒过大，展开时溶剂推进速率太快，分离效果不好。颗粒太小，展开太慢，斑点拖尾不集中，分离效果差。颗粒大小固定在一定范围内且薄层厚度均匀一致时，迁移率可保持恒定。无机支持剂的颗粒为150～200目，薄层厚度为0.25～1mm较合适。有机支持剂的颗粒为70～140目，薄层厚度为1～2mm较合适。